PRRSV变异株ORF6基因与IL-18共表达真核质粒的构建及其表达

作     者：王晓莉 李志杰 丁壮 张泉鹏 宣华 王贵平 WANG Xiao-li;LI Zhi-jie;DING Zhuang;ZHANG Quan-peng;XUAN Hua;WANG Gui-ping

作者机构：吉林大学畜牧兽医学院吉林长春130062 广东省农科院兽医研究所广东广州510000 

基　　金：广东省科技攻关重大项目(2008A020100020) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2010年第30卷第10期

页      码：1282-1285,1290页

摘      要：针对白细胞介素18(IL-18)基因和本实验室分离的PRRSVJL/07/SW毒株全基因序列,分别设计了2对特异性引物,扩增出IL-18基因和ORF6基因。将2个目的基因克隆于真核表达载体pEGFP-N1中,成功构建了重组真核质粒pEGFP-ORF6和pEGFP-IL18-ORF6,阳性质粒转染Marc-145细胞进行筛选。通过表达载体在转染细胞中的高效转染,增强型绿色荧光蛋白(EGFP)快速、准确的反映出阳性质粒在细胞质中的正确表达,再通过SDS-PAGE和Western blot鉴定构建的真核表达质粒pEGFP-IL18-ORF6的正确性。结果表明,ORF6基因和IL-18基因在Macr-145细胞中能有效表达。结论,所构建的真核质粒pEGFP-IL18-ORF6结构正确,能够在Marc-145细胞中高效表达,而且表达产物具有特异免疫学反应。

主 题 词：PRRSV 真核质粒pEGFP-IL18-ORF6 表达 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2010.10.004

馆 藏 号：203112123...