猪繁殖与呼吸综合征病毒PCR-DHPLC检测新技术的建立及应用

作     者：杨春华 祝建新 钟毅 孙思扬 沈艳 陈庆富 王川庆 

作者机构：河南农业大学牧医工程学院河南郑州450002 江西出入境检验检疫局检验检疫综合技术中心江西南昌330002 

基　　金：国家质检局科技计划项目(2009IK029) 

出 版 物：《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期：2012年第32卷第2期

页      码：167-171页

摘      要：应用PCR结合变性高效液相色谱(DHPLC)技术检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV),根据PRRSV GP5基因的序列特点设计特异性引物,PCR扩增产物经DHPLC技术进行快速检测。以猪细小病毒、猪圆环病毒Ⅱ型、猪流感病毒、猪瘟病毒和猪伪狂犬病毒进行特异性试验,无交叉反应,具有较好的特异性和重复性;对阳性标准品的检测结果表明,所建立的PCR-DHPLC法灵敏度可达1.0×101拷贝/μL。对16份疑似病料分别应用本试验所建立的PCR-DHPLC法与SYBR GreenⅠ实时荧光PCR法、PCR-凝胶电泳法、病毒培养法进行检测,发现有15份荧光定量PCR阳性,15份PCR-DHPLC阳性,12份PCR-凝胶电泳阳性。结果表明,建立的PCR-DHPLC法具有特异、敏感、快速、重复性好等优点,可用于临床PRRSV感染的早期诊断以及分子流行病学调查。

主 题 词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 GP5基因 变性高效液相色谱 实时荧光PCR 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.16303/j.cnki.1005-4545.2012.02.014

馆 藏 号：203112123...