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非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失株三重荧光定量PCR鉴别检测方法的建立及应用

非洲猪瘟病毒野毒株与基因缺失株三重荧光定量PCR鉴别检测方法的建立及应用

作     者:郭振华 邢广旭 翁茂洋 金前跃 乔松林 张改平 GUO Zhenhua;XING Guangxu;WENG Maoyang;JIN Qianyue;QIAO Songlin;ZHANG Gaiping

作者机构:河南省农业科学院动物免疫学重点实验室河南郑州450002 河南农业大学动物医学学院河南郑州450002 江苏高校动物重要疫病与人兽共患病防控协同创新中心江苏扬州225009 

基  金:河南省重点研发与推广专项基金资助项目(202102110248) 河南省农业科学院优秀青年科技基金资助项目(2020YQ15) 河南省生猪产业技术体系资助项目(S2012-06) 

出 版 物:《中国兽医学报》 (Chinese Journal of Veterinary Science)

年 卷 期:2022年第42卷第4期

页      码:619-625页

摘      要:针对非洲猪瘟病毒B646L、MGF505-2R和CD2v基因分别设计了引物和探针,经过条件优化,建立了基于TaqMan探针技术的三重荧光定量PCR检测方法。结果显示,本研究建立的三重荧光定量PCR检测方法与猪场常见病毒的核酸不发生交叉反应,具有良好的特异性;敏感性分析显示,针对B646L、MGF505-2R和CD2v基因的最低检测下限分别为6.5,8.0和14.0 copies/μL;并且该方法在10~10copies/μL模板范围内具有良好的线性关系,组间变异系数为0.05%~2.68%,组内变异系数为0.10%~1.17%,稳定性良好。进一步针对临床核酸样品的检测显示,本方法和OIE推荐的检测方法具有良好的一致性。本研究成功建立了非洲猪瘟病毒野毒株和基因缺失株的荧光定量PCR鉴别检测方法,为临床非洲猪瘟病毒的监测诊断提供了良好的技术支撑。

主 题 词:非洲猪瘟病毒 荧光定量PCR B646L基因 MGF505-2R基因 CD2v基因 

学科分类:090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.16303/j.cnki.1005-4545.2022.04.01

馆 藏 号:203112196...

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