微流控芯片技术在布鲁氏菌检测中的应用

作     者：李翔 董占柱 陈昊 孙欣 包春喜 李英智 牛艺卿 郝明媛 赵志军 杜彦丹 LI Xiang;DONG Zhanzhu;CHEN Hao;SUN Xin;BAO Chunxi;LI Yingzhi;NIU Yiqing;HAO Mingyuan;ZHAO Zhijun;DU Yandan

作者机构：内蒙古民族大学第二临床学院内蒙古通辽市科尔沁区第一人民医院检验科内蒙古通辽028000 内蒙古民族大学第二临床学院内蒙古林业总医院检验科内蒙古牙克石022150 内蒙古民族大学第二临床学院内蒙古林业总医院眼科内蒙古牙克石022150 内蒙古民族大学第二临床学院内蒙古林业总医院心内科内蒙古牙克石022150 内蒙古民族大学第二临床学院内蒙古林业总医院核医学科内蒙古牙克石022150 呼伦贝尔市传染病医院检验科内蒙古扎兰屯162650 内蒙古民族大学第二临床学院内蒙古林业总医院普外科内蒙古牙克石022150 

基　　金：内蒙古自治区卫生健康科技计划项目(202201609) 

出 版 物：《分子诊断与治疗杂志》 (Journal of Molecular Diagnostics and Therapy)

年 卷 期：2022年第14卷第5期

页      码：731-735页

摘      要：目的建立并评估基于微流控芯片(MC)技术检测布鲁氏菌(简称布氏菌)核酸的方法,以提高布鲁氏病(简称布病)的诊断能力。方法设计MC核酸提取、PCR和DNA反向斑点杂交相结合的检测布氏菌DNA的全自动技术流程。设计微流控全自动核酸检测(MC⁃PCR)与基因测序符合性测试、与实时荧光定量核酸扩增检测(qPCR)、TaqMan探针法检测比较实验;评估MC⁃PCR法检测布氏菌的重复性、准确性、特异性、最低检出限。结果研究组与对照组核酸溶解曲线图纵坐标峰值所对应的横坐标一致,呈现单一的溶解峰,温度相同,表示为相同的扩增产物。核酸不同提取方法之间Ct值差异有统计学意义(P0.05)。基因测序的Kappa值为0.659,与MC⁃PCR具有高度的一致性,MC⁃PCR与基因测序阳性结果符合率100%,总符合率82.5%。准确性:结果符合率为100%;特异性:结果阴性率100%;重复性:结果均可以检出布氏菌;检出限:浓度为825 copies/mL时,MC⁃PCR与qPCR、TaqMan探针法检出率差异有统计学意义(χ^(2)=24.699,P<0.05),经两两比较,MC⁃PCR检出率高于qPCR和TaqMan探针法。精密度:结果均可以检出布氏菌。结论MC⁃PCR检测布氏菌核酸的检测方法安全、快捷、及时、精准,可以应用于临床。这将提高布病诊断率,对布鲁氏菌病的防治起到重要作用。

主 题 词：布鲁氏菌 微流控芯片 聚合酶链式反应 血清 

学科分类：100208[100208] 1004[医学-公共卫生预防医学类] 1002[医学-临床医学类] 100401[100401] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-6929.2022.05.005

馆 藏 号：203112313...