1株新型鸭呼肠孤病毒强毒株的分离鉴定和致病性试验

作     者：王美红 王占新 张琬玓 苏朗驹 张雪莲 黄淑坚 覃健萍 鲁俊鹏 李智丽 袁生 WANG Meihong;WANG Zhanxin;ZHANG Wandi;SU Langju;ZHANG Xuelian;HUANG Shujian;QIN Jianping;LU Junpeng;LI Zhili;YUAN Sheng

作者机构：佛山科学技术学院生命科学与工程学院广东佛山528225 温氏食品集团股份有限公司广东云浮527439 

基　　金：广东省教育厅重点领域项目(2020ZDZX1004) 

出 版 物：《黑龙江畜牧兽医》 (Heilongjiang Animal Science And veterinary Medicine)

年 卷 期：2022年第12期

页      码：74-77,83,131页

摘      要：为了从引起雏鸭肝脏出血、脾脏白色坏死的临床病例中分离新型鸭呼肠孤病毒(novel Duck reovirus,NDRV)毒株并研究其致病力,试验根据鸭呼肠孤病毒S3基因序列设计1对特异性引物,对发病番鸭肝脏、脾脏组织研磨液进行RT-PCR鉴定,并将研磨液无菌处理后接种Vero细胞分离病毒,根据鸭呼肠孤病毒S1基因(包括δC基因)设计引物对分离毒株的δC基因进行克隆测序,以GenBank中部分毒株序列为参考,进行遗传进化分析,构建系统发育树。以剂量为2×10^(5)TCID_(50)细胞病毒液对1日龄番鸭进行颈部皮下注射,进行动物回归试验。结果表明:特异性RT-PCR检测组织病料研磨液为阳性,在Vero细胞上连续传至5代出现明显的细胞融合现象且能稳定传代,病毒含量为1×10^(-4.33)TCID_(50)/0.1 mL。δC基因克隆测序结果在NCBI上进行BLAST比对显示,分离毒株与2009年以来公布的部分NDRV毒株核苷酸序列相似性为98.45%~99.17%,高度相似。以δC基因构建系统发育树显示,该分离毒株处于水禽呼肠孤病毒基因2型分支,与水禽呼肠孤病毒基因1型和禽源呼肠孤病病毒距离较远。攻毒雏番鸭死亡率为40%,剖检发现肝脏出血,脾脏肿大,有轻微坏死灶或大面积坏死灶,有些质地较硬,肝细胞变性坏死、淋巴细胞浸润,脾脏淋巴细胞缺失,可见大面积坏死灶。说明本试验成功分离到1株NDRV流行毒株,且毒力较强。

主 题 词：新型鸭呼肠孤病毒 分离鉴定 δC基因 遗传进化 致病试验 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.03.0148

馆 藏 号：203112334...