微流控芯片环介导恒温扩增技术快速检测8种肠道致病菌

作     者：宋娜 刘朝阳 李梦蓝 王玉飞 杨晓莉 孙振学 SONG Na;LIU Chaoyang;LI Menglan;WANG Yufei;YANG Xiaoli;SUN Zhenxue

作者机构：解放军总医院第三医学中心检验科北京100039 

基　　金：国家重点研发计划(2018YFC1603705) 

出 版 物：《国际检验医学杂志》 (International Journal of Laboratory Medicine)

年 卷 期：2022年第43卷第12期

页      码：1425-1429页

摘      要：目的结合微流控芯片环介导恒温扩增技术(LAMP),建立可同时检测粪便中8种肠道致病菌的微流控芯片LAMP检测方法,为感染性腹泻的临床诊断提供依据。方法根据8种肠道致病菌(志贺菌、沙门菌、副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、肠聚集性大肠埃希菌、肠侵袭性大肠埃希菌、肠致病性大肠埃希菌、肠产毒素大肠埃希菌)的特异目的基因分别设计微流控芯片LAMP引物,加入EvaGreen荧光染料,采用微流控芯片LAMP对8种肠道致病菌同时进行实时荧光监测;提取8种肠道致病菌的基因组DNA,对建立微流控芯片LAMP的特异度和灵敏度进行评价;制备模拟粪便样本对该技术的最低检出限进行评价。结果微流控芯片LAMP可实现8种肠道致病菌的特异性检测,对福氏志贺菌、鼠伤寒沙门菌、副溶血性弧菌、空肠弯曲菌、肠聚集性大肠埃希菌、肠侵袭性大肠埃希菌、肠致病性大肠埃希菌和肠产毒素大肠埃希菌的检测灵敏度可达100 CFU/mL;对模拟粪便样本中福氏志贺菌、鼠伤寒沙门菌、副溶血性弧菌、肠道侵袭性大肠埃希菌、肠道致病性大肠埃希菌、肠产毒素大肠埃希菌的最低检出限均为100 CFU/mL;对空肠弯曲菌和肠聚集性大肠埃希菌的最低检出限为1000 CFU/mL。结论该实验建立的微流控芯片LAMP特异性好、灵敏度高、结果准确,可用于粪便中8种肠道致病菌的同步快速检测。

主 题 词：微流控芯片 环介导恒温扩增技术 肠道致病菌 

学科分类：1010[医学-医学技术类] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-4130.2022.12.004

馆 藏 号：203112461...