稳定干扰长链非编码RNA LINC01224结直肠癌细胞株的建立及其对细胞凋亡的影响

作     者：李国丹 杨勤 李秋燕 陈小谊 符伟玉 兰柳波 林小聪 Li Guodan;Yang Qin;Li Qiuyan;Chen Xiaoyi;Fu Weiyu;Lan Liubo;Lin Xiaocong

作者机构：广东医科大学生物化学与分子生物学研究所湛江524023 

基　　金：广东省自然科学基金(编号:2020A1515011449) 湛江市科技发展专项资金竞争性分配项目(编号:2019A01010,2021A05043) 

出 版 物：《安徽医科大学学报》 (Acta Universitatis Medicinalis Anhui)

年 卷 期：2022年第57卷第6期

页      码：908-914页

摘      要：目的 建立稳定干扰长链非编码RNA(lncRNA)LINC01224表达的结直肠癌LoVo和SW620细胞株,并探讨下调LINC01224表达对结直肠癌细胞凋亡的影响。方法 使用GEPIA2数据库分析LINC01224在结直肠癌组织中的表达情况;qPCR法检测LINC01224在10种人结直肠癌细胞中的表达水平。3种不同的LINC01224 siRNA分别转染人结直肠癌LoVo细胞,取抑制LINC01224表达效果最显著的siRNA序列构建LINC01224 shRNA慢病毒载体。在HEK293T细胞内包装成重组慢病毒颗粒,再感染LoVo和SW620细胞,经嘌呤霉素筛选后以有限稀释法获得稳定干扰LINC01224的单克隆细胞。MTS法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡率。结果 LINC01224在结直肠癌组织中的表达高于正常结直肠组织,其在10种结直肠癌细胞中的表达也高于正常结直肠上皮细胞HCOEPic。siRNA-3对LoVo细胞内LINC01224表达的抑制率高于siRNA-1和siRNA-2。故选择siRNA-3设计LINC01224 shRNA。与对照组(sh-NC组)相比,稳定干扰LINC01224组(sh-LINC01224组)LoVo和SW620细胞内LINC01224的表达水平降低(P<0.01),其细胞生长速度减慢(P<0.01),凋亡率也增加(P<0.01)。结论 成功构建LINC01224的shRNA慢病毒干扰载体,该载体能够稳定感染LoVo和SW620细胞,下调LINC01224表达并诱导细胞凋亡。

主 题 词：结直肠癌 长链非编码RNA 慢病毒 凋亡 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2022.06.012

馆 藏 号：203112470...