鸭肝炎病毒Ⅰ型基因片段的原核表达及单克隆抗体的制备

作     者：高骏 孙凤萍 GAO Jun;SUN Feng-ping

作者机构：上海市农业科学院畜牧兽医研究所上海201106 

基　　金：上海市科委科技创新行动计划(09140900300)资助 

出 版 物：《上海农业学报》 (Acta Agriculturae Shanghai)

年 卷 期：2012年第28卷第2期

页      码：17-20页

摘      要：根据Genebank上已报道的鸭肝炎病毒Ⅰ型基因的全长序列,设计了1对引物,通过RT-PCR方法扩增出特异的DHV-Ⅰ基因片段;将该片段克隆入原核表达载体pET-28a,转化大肠杆菌Rosetta-gami(DE3),并用IPTG诱导表达后,通过Ni柱纯化,获得了表观分子量在20kD左右的融合表达蛋白;将表达纯化后的蛋白作为抗原,免疫BALB/c健康小鼠,筛选和制备了1株DHV-Ⅰ单克隆抗体细胞株。Western-blot及ELISA分析表明:表达的重组蛋白均能与鸭DHV-Ⅰ阳性血清和制备的DHV-Ⅰ单克隆抗体产生反应。同时,制备的DHV-Ⅰ单克隆抗体除了能与重组蛋白反应,还能识别天然的DHV-Ⅰ病毒蛋白。

主 题 词：鸭肝炎病毒Ⅰ型 原核表达 单克隆抗体 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-3924.2012.02.005

馆 藏 号：203112620...