小鼠植入前胚胎紧密化相关基因Crg1的克隆

作     者：李汶 卢光琇 

作者机构：中南大学生殖与干细胞工程研究所长沙410078 

基　　金：国家重点基础研究发展规划(973)资助项目(编号 :G19990 55901)~~ 

出 版 物：《Acta Genetica Sinica》 (ACTA GENETICA SINICA)

年 卷 期：2004年第31卷第3期

页      码：246-250页

摘      要：从已获得的运用抑制消减杂交技术 (SuppressionSubtractiveHybridization ,SSH)分离、克隆和筛选代表 8 细胞早期胚胎和紧密化 8 细胞胚胎差别表达基因的ESTs片段 (GenBank登录号 :BQ740 2 63、BQ740 2 51)入手 ,经比较二者的同源性发现这两个EST末端反向互补 ,拼接成一个cDNA片段 ,经分析此序列包含一个完整的阅读框 ,提交给GenBank ,登录号为AY13 4 859。根据此序列设计引物从小鼠 8 细胞紧密化胚胎cDNA中经PCR扩增出目的片段 ,克隆入pUCm T载体后测序而获得全长cDNA ,为小鼠植入前胚胎紧密化相关基因Crg1,分析比较证明Crg1基因与AY13 4 859基本吻合。Crg1基因的cDNA全长为 810bp ,只有一个外显子 ,编码由 150个氨基酸组成 ,分子量理论值为 17 67kD的蛋白质。与最新的小鼠基因组工作草图进行电子杂交 ,该基因被定位在小鼠的 14号染色体上。RT PCR实验证明在小鼠植入前各个时期的胚胎、小鼠胚胎干细胞中均有表达 ,在小鼠胚胎成纤维细胞中没有表达。半定量RT PCR实验证明Crg1基因在紧密化胚胎中表达较 8 细胞胚胎高。采用Northern blot手段分析Crg1基因在成年小鼠的 8种组织中的表达情况 ,结果表明该基因只在小鼠卵巢中有微弱的表达 ,转录本大小为 1 2kb ,而在成年小鼠的脑、心脏、肾、睾丸、肝脏、肺、

主 题 词：基因克隆 植入前胚胎 紧密化 RT—PCR 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 1001[医学-基础医学] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录：

馆 藏 号：203112691...