鉴别小反刍兽疫病毒野毒和疫苗毒双重荧光RT-PCR检测方法的建立

作     者：杨夷平 马春江 杨康 杨帆 方先珍 YANG Yi-ping;MA Chun-jiang;YANG Kang;YANG Fan;FANG Xian-zhen

作者机构：新疆哈密市动物疫病预防控制中心新疆哈密839000 

出 版 物：《草食家畜》 (Grass-Feeding Livestock)

年 卷 期：2022年第4期

页      码：16-21页

摘      要：为快速准确检测小反刍兽疫病毒野毒和疫苗毒,建立一种特异性强、灵敏性高、经济实惠的实验室鉴别诊断方法,在同一反应体系内同时鉴别诊断小反刍兽疫野毒株和疫苗毒株用于应对该疫病诊断,使实验室检测工作更具有实效性。根据基因库中基因组序列设计2对特异性引物和探针,通过优化反应体系和扩增条件,建立能够同时检测并鉴别小反刍兽疫病毒(PPRV)野毒和疫苗毒的双重荧光RT-PCR检测方法。结果表明,建立的双重荧光RT-PCR可特异性检测小反刍兽疫野毒(FAM通道)和疫苗毒(TAMRA通道);敏感性实验表明,野毒(FAM通道)可检测到10^(-3)稀释度的RNA,疫苗毒(TAMRA通道)可检测到10^(-5)稀释度的RNA;用建立的二重荧光RT-PCR方法对20份样品进行检测,结果显示,该方法可以有效区分野毒和疫苗毒株,且检测结果与商品试剂盒检测结果一致,可用于临床检测。

主 题 词：鉴别检测 小反刍兽疫病毒 野毒 疫苗毒 荧光RT-PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16863/j.cnki.1003-6377.2022.04.004

馆 藏 号：203113211...