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黑曲霉脂肪酶:基因克隆、表达及体外复性

黑曲霉脂肪酶:基因克隆、表达及体外复性

作     者:舒正玉 杨江科 徐莉 闫云君 SHU Zheng-Yu;YANG Jiang-Ke;XU Li;YAN Yun-Jun

作者机构:华中科技大学生命科学技术学院武汉430074 

基  金:国家"863"计划项目基金(No.2003AA214061) 

出 版 物:《微生物学通报》 (Microbiology China)

年 卷 期:2007年第34卷第3期

页      码:443-446页

摘      要:根据黑曲霉F044脂肪酶N-端氨基酸序列,运用生物信息学方法,找到与黑曲霉脂肪酶基因同源的候选基因A84689。根据该基因序列,设计引物直接PCR扩增得到黑曲霉脂肪酶全长基因anl。anl全长1044bp,含3个内含子,编码297个氨基酸(含信号肽27个氨基酸),与其它脂肪酶基因没有明显同源性。将编码成熟脂肪酶的anl连接到pET28a载体上得到重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(De3),诱导表达并纯化出目的蛋白。通过大量稀释和DEAESepharoseFastFlow层析相结合的方法,变性后的纯化蛋白在体外实现再折叠复性。

主 题 词:黑曲霉 脂肪酶 基因克隆 大肠杆菌 大量表达 包涵体 复性 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

核心收录:

D O I:10.13344/j.microbiol.china.2007.03.011

馆 藏 号:203113213...

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