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STAT3 RNAi联合γ射线照射对U251细胞增殖的影响

STAT3 RNAi联合γ射线照射对U251细胞增殖的影响

作     者:高玲 李峰生 董波 张军权 饶亚岚 王治东 丛悦 毛秉智 陈肖华 

作者机构:军事医学科学院放射与辐射医学研究所北京100850 

基  金:国家自然科学基金资助项目(30770640) 

出 版 物:《中华放射医学与防护杂志》 (Chinese Journal of Radiological Medicine and Protection)

年 卷 期:2008年第28卷第1期

页      码:17-20页

摘      要:目的构建特异性抑制信号转导与转录激活因子3(STAT3)的小干扰RNA(siRNA)表达载体并检测联合^60Coγ射线照射对U251细胞STAT3表达及细胞增殖的抑制作用。方法设计、合成STAT3特异性的19bD短链寡核苷酸,经退火形成双链DNA片段,克隆到pSilence2.1-U6-H1载体中,构建STAT3特异siRNA的表达载体,HindⅢ和BamHⅠ双酶切及测序鉴定重组体。并转染U251细胞,免疫印迹法(Western blot)检测STAT3 mRNA和蛋白的表达水平,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测细胞增殖活性,克隆形成率及MTT实验确定放疗剂量。结果经双酶切与测序鉴定成功构建pSilence2.1-STAT3表达载体,转染星形胶质瘤细胞株U251细胞可显著抑制细胞中STAT3蛋白的表达水平;确定2Gy为放疗剂量。转染pSilence2.1-STAT3。细胞增殖活性较未转染U251细胞显著降低(P〈0.05),联合^60Coγ射线照射U251细胞增殖活性单独转染进一步显著降低(P〈0.05)。结论运用pSilence2.1-U6-H1载体构建的pSilence2.1-STAT3表达载体可有效抑制STAT3的表达及星形胶质瘤细胞的增殖;联合2Gy ^60Coγ射线照射可增加抑制效果。

主 题 词:小干扰RNA 转录激活因子3 U251细胞 

学科分类:1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.3760/cma.j.issn.0254-5098.2008.01.005

馆 藏 号:203113233...

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