siRNA沉默Ppif基因表达对大鼠肾细胞增殖和凋亡的影响

作     者：胡威 陈志强 叶章群 夏宗禹 马杰锋 夏丁 朱珉 陈刚 Wei HU;Zhiqiang CHEN;Zhangqun YE;Zhongyu XIA;Jiefeng MA;Ding XIA;Min ZHU;Gang CHEN

作者机构：华中科技大学同济医学院附属同济医院泌尿外科武汉430030 华中科技大学同济医学院附属同济医院器官移植研究所 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(No.30670820) 

出 版 物：《临床泌尿外科杂志》 (Journal of Clinical Urology)

年 卷 期：2010年第25卷第1期

页      码：53-57页

摘      要：目的:应用小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)抑制大鼠基因Ppif的表达,探讨其对大鼠肾细胞(NRK)增殖和凋亡的影响。方法:体外化学合成针对Ppif基因的siRNA序列,在脂质体介导下转染NRK细胞,RT-PCR检测Ppif mRNA表达水平,Western blot检测Ppif蛋白表达水平,流式细胞仪检测细胞凋亡状况,MTT法检测细胞增殖活性。结果:Ppif siRNA转染NRK细胞24 h后,所设计的3对针对不同靶点的siRNA与对照组相比,起始于405、556位点的siRNA在基因水平对Ppif无明显抑制效应(P>0.05);起始于198位点的siRNA在基因和蛋白水平均有明显的抑制效应,基因水平下降75.25%(P<0.05);蛋白水平下降72.13%(P<0.05)。MTT结果显示NRK细胞增殖能力显著增加,转染24 h后,siRNA1～siRNA4细胞抑制率分别为(68.6±3.6)%、(5.3±4.3)%、(7.6±6.3)%和(4.1±4.5)%,凋亡率明显下降。结论:体外化学合成的Ppif siRNA(起始于198位点)可以有效地抑制NRK细胞Ppif的表达,从而抑制细胞凋亡,促进细胞增殖。

主 题 词：RNA干扰 小干扰RNA Ppif基因 大鼠肾细胞 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071007[071007] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-1420.2010.01.020

馆 藏 号：203113323...