珍稀植物浙江雪胆SCoT-PCR体系的建立及优化

作     者：李景会 方翎郦 陈明辉 李彦蓉 张慧娟 蒋明 Li Jinghui;Fang Lingli;Chen Minghui;Li Yanrong;Zhang Huijuan;Jiang Ming

作者机构：台州学院生命科学学院椒江318000 

基　　金：国家级大学生创新创业训练计划项目(201910350002)资助 

出 版 物：《分子植物育种》 (Molecular Plant Breeding)

年 卷 期：2022年第20卷第12期

页      码：3998-4003页

摘      要：为建立浙江雪胆SCoT-PCR的最佳反应体系,本研究采用正交实验对dNTPs、引物、模板DNA及Taq聚合酶等的浓度进行筛选,并对采自景宁畲族自治县的材料进行验证。结果表明,PCR体系中各因素用量对多态性结果的影响大小依次是引物>dNTPs=Taq酶>模板DNA,最佳反应体系(20μL)为0.7μL dNTPs(10 mmol/L),0.3μL引物(20μmol/L),0.4μL Taq酶(2 U/μL),1.2μL DNA模板(20 ng/μL),2μL 10×缓冲液(含20 mmol/L Mg^(2+)),dd H_(2)O 15.4μL;筛选出11条稳定性好、多态性高和重复性好的引物,同时优化了它们的最佳退火温度;对10份种质资源进行验证,结果表明该体系扩增的结果稳定、扩增条带清晰。浙江雪胆SCoT-PCR体系的建立和优化,为后续开展遗传多样性研究、资源保护和分子育种提供了依据。

主 题 词：珍稀植物 浙江雪胆 SCoT-PCR 正交设计 

学科分类：1008[医学-中药学类] 10[医学] 

D　O　I：10.13271/j.mpb.020.003998

馆 藏 号：203113343...