沙眼衣原体主要外膜蛋白多肽多克隆抗体的制备与鉴定

作     者：徐青青 陈文韬 江银波 蓝银苑 潘钰莹 曾丽红 杨建江 薛耀华 郑和平 XU Qingqing;CHEN Wentao;JIANG Yinbo;LAN Yinyuan;PAN Yuying;ZENG Lihong;YANG Jianjiang;XUE Yaohua;ZHENG Heping

作者机构：安徽医科大学广东皮肤病临床学院合肥230032 广东省皮肤病医院广州510091 南方医科大学皮肤病医院广州510091 

基　　金：国家自然科学基金项目(编号:81974307) 广东省自然科学基金项目(编号:2018A030313662) 广东省普通高校特色创新类项目(编号:2021KTSCX014) 广东省中医药局中医药科研项目(编号:20211276) 

出 版 物：《实用医学杂志》 (The Journal of Practical Medicine)

年 卷 期：2022年第38卷第11期

页      码：1333-1338页

摘      要：目的 沙眼衣原体主要外膜蛋白(major outer membrane protein,MOMP)在维持沙眼衣原体结构稳定性和衣原体感染宿主细胞过程中发挥重要作用,为深入研究MOMP蛋白的功能及作用机制,使用人工合成多肽制备MOMP多克隆抗体。方法 分析沙眼衣原体MOMP的抗原表位,根据15个沙眼衣原体血清型MOMP保守肽段,设计并合成MOMP特异性肽段,与血蓝蛋白偶联后免疫新西兰兔。采用免疫亲和层析纯化免疫血清,应用SDS-PAGE和ELISA评估血清抗体纯度及效价,利用Western blot和免疫荧光染色鉴定MOMP抗体特异性。结果 纯化后的血清IgG抗体纯度为89.6%,MOMP抗体效价达1∶12 800,Western blot结果显示抗体与8个血清型沙眼衣原体蛋白在40 kDa处特异性结合,免疫荧光染色证实该抗体可特异性结合沙眼衣原体。此外,MOMP抗体与进口商品化抗体明显共定位于宿主细胞内,且两种抗体荧光强度相当。结论 本研究成功制备效价高、特异性好的沙眼衣原体MOMP的兔多克隆抗体,为后续深入研究MOMP的生物学功能提供了有力工具。

主 题 词：沙眼衣原体 主要外膜蛋白 多肽 多克隆抗体 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1006-5725.2022.11.007

馆 藏 号：203113368...