病毒性神经坏死病毒实时荧光RT-RAA快速检测方法的建立

作     者：朱裕敏 吴江 王津津 廖立珊 郑晓聪 贾鹏 刘荭 ZHU Yu-min;WU Jiang;WANG Jin-jin;LIAO Li-shan;ZHENG Xiao-cong;JIA Peng;LIU Hong

作者机构：大连海洋大学辽宁大连116023 深圳海关动植物检验检疫技术中心广东深圳518045 深圳技术大学广东深圳518118 

基　　金：海关总署揭榜挂帅项目(2021HK007) 深圳海关科研项目(2020SZHG003) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2022年第52卷第7期

页      码：824-829页

摘      要：为建立一种简单、快速检测病毒性神经坏死病毒(VNNV)的重组酶介导等温扩增(RAA)方法,本研究通过比较分析VNNV RNA2基因保守序列,设计引物与探针。经过筛选优化,建立了VNNV实时荧光RT-RAA快速检测方法。结果显示,该方法在39℃恒温反应15 min即可快速、特异性地检测出VNNV,并与常见的鱼类RNA病毒核酸不发生交叉反应,其对标准质粒的检测下限为2.6×10^(1)copies/μL,组内和组间变异系数均小于5%。利用该方法对48份实验室及送检样品进行检测,结果与实时荧光RT-PCR的一致。上述结果表明,本研究建立的检测方法操作简单,特异性强,敏感性高,结果可靠,且不依赖于复杂的仪器,可适用于现场和实验室对VNNV的快速检测。

主 题 词：病毒性神经坏死病毒 重组酶介导等温扩增方法 恒温扩增 快速检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0121

馆 藏 号：203113388...