Plcd1转基因小鼠的制备

作     者：杨伟伟 殷筱舒 殷黎静 张艳丽 李高天 刘桂杰 俞利平 顾美儿 吴宝金 

作者机构：杭州师范大学实验动物中心浙江杭州310036 山东省青岛第十七中学山东青岛266031 江苏大学实验动物中心江苏镇江212013 

基　　金：国家自然科学基金项目(31071092) 浙江省公益性技术应用研究计划项目(2012C37084) 浙江省大学生科技创新活动计划(新苗人才计划)2011R421029 

出 版 物：《杭州师范大学学报（自然科学版）》 (Journal of Hangzhou Normal University(Natural Science Edition))

年 卷 期：2013年第12卷第1期

页      码：1-7页

摘      要：通过制备Plcd1转基因小鼠研究Plcd1基因功能.首先逆转录PCR获得约2.2kb的Plcd1基因全长,T载体克隆后测序验证;以pMD19-T-Plcd1为模板,通过设计引物及PCR扩增引入酶切位点,与pEF6/V5-His同时进行酶切、连接,构建pEF6/V5-His-Plcd1表达载体;经真核表达验证后,酶切获得目标片段,显微注射681枚受精卵,在82只仔鼠中获得转基因阳性首建鼠15只,其中13只稳定遗传并建系.PLCD1-HIS融合蛋白在睾丸组织中表达,在皮肤组织中无表达.Plcd1转基因小鼠为Plcd1功能研究奠定了基础.

主 题 词：Plcd1 pEF6 V5-His-Plcd1 显微注射 转基因小鼠 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071002[071002] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-232X.2013.01.001

馆 藏 号：203113460...