基于细菌酯酶活性的叠氮噻唑橙分子设计与特性验证

作     者：余以刚 黄韵 李晓凤 肖性龙 吴晖 Yu Yi-gang;Huang Yun;Li Xiao-feng;Xiao Xing-long;Wu Hui

作者机构：华南理工大学轻工与食品学院广东广州510640 

基　　金：国家自然科学基金青年基金资助项目(31101279) 国家自然科学基金资助项目(31271867) 教育部高等学校博士学科点专项科研基金新教师类资助课题(20110172120034) 华南理工大学中央高校基本科研业务费专项资金重点资助项目(2013ZZ0068) 

出 版 物：《华南理工大学学报（自然科学版）》 (Journal of South China University of Technology(Natural Science Edition))

年 卷 期：2013年第41卷第10期

页      码：53-59页

摘      要：为了建立一种新型、高效的活菌检测技术,以细菌酯酶代谢活性为判断依据,设计合成了一种新型噻唑橙荧光染料——TOMA,其结构经核磁共振谱、高分辨质谱确证.对TOMA的细胞膜穿透性、酯酶敏感性及对DNA的PCR扩增的抑制作用3方面特性进行了初步验证.结果显示:10 mg/L的TOMA于室温、黑暗条件下与活的大肠杆菌(Escherichia coli)O157:H7混合孵育10 min后菌体发出强烈荧光,表明该分子能有效穿透细菌壁膜,并与核酸有良好的结合能力;用固定化脂肪酶对TOMA进行体外水解,水解率达83%,说明该分子的酯键能在相关酶作用下断裂;TOMA与实时荧光定量PCR联用时,该分子对细菌DNA扩增具有明显的抑制作用.以上结果证明TOMA分子设计基本达到预期目的.

主 题 词：细菌 酯酶 代谢活性 噻唑橙荧光染料 PCR DNA扩增 荧光 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 081702[081702] 07[理学] 08[工学] 0817[工学-轻工类] 071007[071007] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-565X.2013.10.009

馆 藏 号：203113498...