一步法CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR诊断方法的建立与初步应用

作     者：袁秀芳 路斌 徐丽华 李军星 王一成 YUAN Xiu-fang;LU Bin;XU Li-hua;LI Jun-xing;WANG Yi-cheng

作者机构：浙江省农业科学院畜牧兽医研究所浙江杭州310021 海盐县畜牧兽医局浙江嘉兴314300 

基　　金：浙江省重大科技专项农业项目(2008C12049) 浙江省重点科技创新团队(2012R10027-13) 

出 版 物：《浙江农业学报》 (Acta Agriculturae Zhejiangensis)

年 卷 期：2015年第27卷第4期

页      码：537-543页

摘      要：根据猪瘟病毒(CSFV)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的序列,分别设计了1对特异性引物和1条Taq Man探针,建立了一步法检测CSFV和PRRSV双重实时荧光定量RT-PCR方法。结果表明,建立的方法特异性高,与PCV2,PRV,PPV,PEDV,JEV,BVDV无交叉反应;可以检出20个拷贝数的模板RNA,比常规RT-PCR方法的灵敏度高10倍;对同一样品进行4次重复试验,变异系数(CV)低于4%,方法重复性好。应用建立的荧光定量RT-PCR和常规RT-PCR对50份疑似病例组织进行检测,结果荧光定量RT-PCR检出30份PRRSV阳性,13份CSFV阳性,均高于常规RT-PCR方法的检出数(24份PRRSV阳性,10份CSFV阳性)。本研究建立的双重实时荧光定量RT-PCR方法具有快速、特异性好、灵敏度高的特点,可用于PRRSV和CSFV的实验室快速诊断和流行病学调查。

主 题 词：猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 双重实时荧光定量RT-PCR 

学科分类：090602[090602] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1004-1524.2015.04.04

馆 藏 号：203113568...