计算机辅助设计提高疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶热稳定性的研究

作     者：万思迪 苗华彪 韩楠玉 WAN Sidi;MIAO Huabiao;HAN Nanyu

作者机构：云南师范大学生命科学学院云南昆明650500 生物能源持续开发利用教育部工程研究中心云南昆明650500 云南师范大学酶工程重点实验室云南昆明650500 

基　　金：云南省科技计划基础研究专项-面上项目(编号:202201AT070033) 

出 版 物：《工业微生物》 (Industrial Microbiology)

年 卷 期：2022年第52卷第3期

页      码：1-8页

摘      要：本文对疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶(Thermomyces lanuginosus lipase,TLL)进行计算机辅助设计以期提高其热稳定性,借助Rosetta旗下自由能计算模块ddg_monomer得出三个突变体(T114W、R175W、R195W)的自由能变化相对野生型TLL小于-5 kcal/mol,预测其可能为热稳定性提高的脂肪酶突变体。将TLL及突变体利用毕赤酵母真核表达系统进行异源表达后,对其酶学性质进行研究比较。结果表明:突变体T114W和R195W在70℃下处理90 min后相对剩余酶活较野生型TLL分别提高了13.46%和22.88%;在80℃下处理30 min后突变体T114W的相对剩余酶活较野生型TLL提高了17.26%。除此之外,突变体T114W和R195W的转酯率较野生型提高了15.12%和8.50%。本研究证明利用计算机辅助设计提供潜在耐热TLL突变体的研究策略是有效可靠的,研究产生的耐热突变体T114W和R195W也能被用于极端条件下的工业生产中,且该研究也为提高工业用耐热性酶提供了参考依据。

主 题 词：计算机辅助设计 脂肪酶 定点突变 热稳定性 

学科分类：08[工学] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1001-6678.2022.03.001

馆 藏 号：203113649...