非洲马瘟病毒RT-RAA快速检测方法的建立

作     者：梅明珠 陈茹 刘志玲 吴晓薇 段燕喻 林志雄 陈俊全 牛晓艺 MEI Ming-Zhu;CHEN Ru;LIU Zhi-Ling;WU Xiao-Wei;DUAN Yan-Yu;LIN Zhi-Xiong;CHEN Jun-Quan;NIU Xiao-Yi

作者机构：广州海关技术中心广州510623 从化海关驻马场办事处广州510900 

基　　金：海关总署科研项目(2020HK149) 

出 版 物：《中国口岸科学技术》 (China Port Science and Technology)

年 卷 期：2022年第4卷第7期

页      码：45-51页

摘      要：根据GenBank中非洲马瘟病毒结构蛋白VP7的编码基因序列,针对不同血清型间VP7中的保守序列设计引物和探针,建立非洲马瘟病毒核酸的RT-RAA检测方法,并对引物和探针浓度进行优化,确定最佳反应浓度。然后对该方法的特异性、敏感性和重复性进行评估。结果显示:本研究建立的非洲马瘟病毒RT-RAA检测方法在42℃恒定温度下20min能够有效检出目标基因片段,与其他马属动物疫病病原及重要经济动物疫病病原核酸无交叉反应,对非洲马瘟病毒阳性质粒的检测灵敏度达到102 copies/μL,重复性好。利用建立的非洲马瘟病毒RT-RAA检测方法对收集的88份马血清、10份马全血和4份非洲马瘟病毒模拟阳性样本进行检测,检测结果与OIE推荐的荧光RT-PCR检测结果一致。本研究建立的非洲马瘟病毒RT-RAA方法特异性强、敏感性高、稳定性好,在20 min内就能够检出样本中非洲马瘟病毒核酸,适用于非洲马瘟病毒核酸的快速检测。

主 题 词：非洲马瘟 逆转录-重组酶介导核酸扩增技术(RT-RAA) 核酸检测 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-4689.2022.07.008

馆 藏 号：203113669...