RNA干扰沉默编码跨膜蛋白35基因表达对肝癌细胞生长及细胞周期的影响

作     者：李坤雨 李牛 王群 张壮壮 韩泽广 邓庆 LI Kun-yu;LI Niu;WANG Qun;ZHANG Zhuang-zhuang;HAN Ze-guang;DENG Qing

作者机构：华东理工大学生物工程学院上海200237 国家人类基因组南方研究中心上海市疾病与健康基因组学实验室上海201203 

基　　金：上海市科委自然科学基金(11ZR1425300) 国家自然科学基金(81101875) 

出 版 物：《兰州大学学报（医学版）》 (Journal of Lanzhou University（Medical Sciences）)

年 卷 期：2012年第38卷第3期

页      码：17-22,26页

摘      要：目的研究跨膜蛋白35(T MEM35)基因在肝癌细胞生长、细胞周期中的作用,探讨跨膜蛋白TMEM35作为潜在肝癌治疗靶点的可行性。方法利用跨膜蛋白二级结构预测工具SPLIT对TMEM35蛋白的二级结构进行分析;利用实时定量多聚酶链反应技术检测TMEM35基因在肝癌患者癌组织及相应癌旁组织中的表达情况;采用化学合成干扰小RNA片段(siRNA)干扰TMEM35基因在肝癌细胞MHCC-97H、MHCC-97L中的表达,通过软琼脂克隆形成实验观察肝癌细胞非贴壁依赖性克隆生长情况,流式细胞术分析细胞周期;通过蛋白功能相互作用网络数据库STRING推测TMEM35蛋白发挥相应功能的搭档基因。结果 TMEM35为具有4个跨膜结构域的四跨膜蛋白,实时定量多聚酶链反应检测发现TMEM35基因在肝癌中表达紊乱,其中与相应癌旁组织相比较,TMEM35在14例癌组织中表达显著上调,在20例癌组织中表达显著下调(P<0.05)。针对TMEM35基因设计合成siR NAs能够特异性沉默TMEM35基因在肝癌细胞株MHCC-97H、MHCC-97L中的表达,并且肝癌细胞在软琼脂培养条件下,形成的克隆显著减少。流式细胞术分析发现干扰TMEM35基因表达,能够减缓细胞周期进展,表现为细胞G_1期增多,S期减少。结论 TMEM35基因编码具有四跨膜结构域的膜蛋白,在肝癌细胞生长中发挥重要作用。

主 题 词：RNA干扰 四跨膜蛋白 肝癌 细胞周期 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1000-2812.2012.03.004

馆 藏 号：203114112...