梨褪绿叶斑伴随病毒的RT-PCR和巢式RT-PCR检测技术建立

作     者：张哲 高晓雯 王海潘 吕玉琢 朱宜庭 王国平 洪霓 ZHANG Zhe;GAO Xiaowen;WANG Haipan;Lü Yuzhuo;ZHU Yiting;WANG Guoping;HONG Ni

作者机构：华中农业大学植物科技学院湖北省作物病害监测与安全控制重点实验室武汉430070 

基　　金：国家重点研发计划(2019YFD1001800) 国家梨产业技术体系(CARS-28-15) 

出 版 物：《植物病理学报》 (Acta Phytopathologica Sinica)

年 卷 期：2022年第52卷第4期

页      码：691-698页

摘      要：梨褪绿叶斑伴随病毒(Pear chlorotic leaf spot-associated virus,PCLSaV)是新近发现的为害梨树的欧洲花楸环斑病毒属(Emaravirus)病毒,该病毒基因组由5条负义单链RNA组成。本研究比较分析了反转录引物pd(N)6、3C和5H及基于该病毒基因组RNA3和RNA5链序列设计的4对引物用于RT-PCR检测梨样品中PCLSaV的效果,结果显示,采用与该病毒基因组RNA链3′末端互补的引物3C用于cDNA合成及基于该病毒RNA5链序列的引物5-F/R用于PCR扩增时,检测PCLSaV的灵敏度相较采用引物pd(N)6和5H合成cDNA为模板时高10-100倍;不同部位和不同发病状况的梨树组织中PCLSaV检测结果差异明显。进一步建立了具有高灵敏度的巢式RT-PCR技术,采用外侧引物5-F/R和内巢引物5-IF/IR结合可用于梨不同组织样品中PCLSaV的检测。本研究为系统分析PCLSaV在我国栽培梨树上的危害状况及无病毒梨种质培育奠定了技术基础。

主 题 词：梨 梨褪绿叶斑伴随病毒 RT-PCR 检测 

学科分类：09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

核心收录：

D　O　I：10.13926/j.cnki.apps.000598

馆 藏 号：203114153...