ITIH4基因重组慢病毒干扰系统的构建

作     者：黄敏 王琪 张玮 李力 

作者机构：桂林医学院附属医院妇产科 广西医科大学附属肿瘤医院妇瘤科南宁530021 

基　　金：广西科技厅开发项目资助(2010GXNSFD013053) 

出 版 物：《中国癌症防治杂志》 (CHINESE JOURNAL OF ONCOLOGY PREVENTION AND TREATMENT)

年 卷 期：2012年第4卷第3期

页      码：242-246页

摘      要：目的构建ITIH4基因重组慢病毒干扰系统。方法选取干扰效果最佳的siRNA片段，设计shRNA结构，退火反应形成双链后采用T4DNA连结酶与线性化慢病毒载体Psico连接，转化大肠杆菌后提取质粒，并经质粒DNA测序和PCR鉴定重组质粒构建是否成功，转染293T细胞并测定培养上液的病毒滴度。结果测序结果显示，重组慢病毒干扰载体Psico／ITIH4测序结果与设计的shRNA序列完全一致，转染293T细胞后，其病毒滴度为9．5×10^3 IU／mL。结论成功地构建了ITIH4基因的重组慢病毒系统，为今后深入研究ITIH4奠定了基础。

主 题 词：人类间α胰蛋白酶H4重链 慢病毒载体 shRNA 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 1001[医学-基础医学] 100103[100103] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1674-5671.2012.03.09

馆 藏 号：203114242...