增殖细胞核抗原siRNA序列的设计、合成与筛选

作     者：蒋建伟 史金桃 吴智慧 曾慧兰 严玉霞 陈涛 丁文婷 JIANG Jian-wei;SHI Jin-tao;WU Zhi-hui;ZENG Hui-lan;YAN Yu-xia;CHEN Tao;DING Wen-ting

作者机构：暨南大学医学院生化教研室广东广州510632 暨南大学附属第一医院血液科广东广州510632 

基　　金：广州市科技计划资助项目(No.2002J1-C0361) 广东省医学科研基金资助项目(No.A2006352) 

出 版 物：《中国病理生理杂志》 (Chinese Journal of Pathophysiology)

年 卷 期：2008年第24卷第3期

页      码：484-489页

摘      要：目的:设计并筛选能有效抑制人肝癌SMMC-7721细胞、人结肠癌Caco2细胞、人胃癌SCG-7901细胞增殖的增殖细胞核抗原(PCNA)siRNA。方法:总结以往提出的siRNA设计原则的基础上,设计4条PCNAsiRNA,体外转录合成PCNAsiRNA;并作用于3种肿瘤细胞,WST-8法检测细胞增殖活性,筛选能有效抑制肿瘤细胞增殖的siRNA序列;RT-PCR检测细胞PCNA mRNA水平;免疫细胞化学方法检测PCNA蛋白表达水平。结果:4条PCNA siRNA中,有3条序列(No.2、No.4、No.3)的siRNA能有效抑制3种肿瘤细胞的增殖;其中No.2、No.4作用效果最优,以50 nmol/L浓度作用48 h,对3种肿瘤细胞的增殖抑制率均可达到62%以上,No.2、No.4 PCNAsiRNA均能在mRNA和蛋白水平显著下调PCNA的表达。结论:PCNA siRNA能在体外有效抑制SMMC-7721细胞、Caco2细胞、SCG-7901细胞的增殖,其适宜作用浓度为50 nmol/L,适宜作用时间为48 h。

主 题 词：增殖细胞核抗原 siRNA 结直肠肿瘤 肝肿瘤 胃肿瘤 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.3321/j.issn:1000-4718.2008.03.016

馆 藏 号：203114243...