基因Ⅵ型新城疫病毒反转录数字PCR检测方法的建立与应用

作     者：王静静 舒波 于晓慧 克军宏 邢安琪 彭真奇 刘华雷 Wang Jingjing;Shu Bo;Yu Xiaohui;Ke Junhong;Xing Anqi;Peng Zhenqi;Liu Hualei

作者机构：中国动物卫生与流行病学中心山东青岛266032 江西农业大学江西南昌330045 塔里木大学新疆阿拉尔843300 宁夏大学宁夏银川750021 安徽农业大学安徽合肥230036 

基　　金：国家重点研发计划项目(2016YFD0500800) 中国动物卫生与流行病学中心创新基金项目 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2022年第39卷第9期

页      码：115-120页

摘      要：基因Ⅵ型新城疫病毒(NDV)是导致我国当前鸽新城疫流行的主要基因型。国家新城疫参考实验室监测数据表明,鸽NDV分离率近年来有上升趋势。为了实现基因Ⅵ型NDV快速检测和精确定量,针对国内流行的基因Ⅵ型NDV F基因保守区域设计特异性引物和探针,建立了反转录数字PCR(RT-dPCR)方法,并对该方法的灵敏度、特异性和重复性进行了评估。结果显示,建立的RT-dPCR方法线性关系良好,灵敏度高,最低检测限为1.97 copies/μL;特异性强,与其他基因型NDV强毒株和常见禽病病毒无交叉反应;重复性好,变异系数为2.2%。利用本方法对临床采集的180份鸽口咽/泄殖腔拭子样品进行检测,检测结果与病毒分离结果一致。以上结果表明,本研究建立的RT-dPCR方法灵敏度高、特异性强、重复性好,可用于基因Ⅵ型NDV的快速检测和精准定量,同时也为基因Ⅵ型NDV核酸标准物质研制奠定了基础。

主 题 词：新城疫病毒 基因Ⅵ型 反转录数字PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2022.09.021

馆 藏 号：203114301...