淋病奈瑟球菌表面Porin B蛋白特异性及免疫保护性临床应用价值分析

作     者：吴学良 戴礼记 王威 李兴 张妮 易军 曾志平 刘拥荣 WU Xueliang;DAI Liji;WANG Wei;LI Xing;ZHANG Ni;YI Jun;ZENG Zhiping;LIU Yongrong

作者机构：湖南中医药大学附属宁乡医院男科中心湖南宁乡410600 湖南中医药大学附属宁乡医院药学部湖南宁乡410600 湖南中医药大学附属宁乡医院医学检验中心湖南宁乡410600 

基　　金：湖南省卫生计生委科研计划课题(B2016223) 宁乡市人民医院校院联合科研基金项目(2019LLXY10) 

出 版 物：《中国性科学》 (Chinese Journal of Human Sexuality)

年 卷 期：2022年第31卷第8期

页      码：136-140页

摘      要：目的研究淋病奈瑟球菌(NG)表面Porin B(Por B)蛋白特异性及免疫保护性在临床中的应用价值。方法登录Gen Bank获取NG世界卫生组织(WHO)标准株E株Por B-PIA基因,设计引物与合成,培养WHO标准株E株,通过聚合酶链反应(PCR)扩增出Por B-PIA DNA片段,采用GST·Bind^(TM)树脂纯化Por B蛋白,对噬菌体随机12肽库进行筛选并对阳性克隆进行提取,应用DNA测序及MIXOX软件分析;将培养后的人尿道上皮细胞分别与Por B蛋白特异性结合的多肽、NG活菌进行培养,并将未加入抗体作为对照组。观察Por B蛋白的纯化表达,Western blot检测Por B蛋白与NG特异性关系,间接酶联免疫吸附试验(ELISA)检测筛选后蛋白的特异性抗体水平,比较Por B蛋白特异性结合多肽对细胞内形成微菌落的差异。结果Ecoli-BL21中克隆表达的诱导产物经Ni+-NTA Purification System纯化后,获得纯度较高的Por B蛋白;制备出Por B蛋白相应的特异性结合多肽,蛋白出现特异性条带;间接ELISA检测筛选后蛋白的特异性抗体水平,筛选后蛋白的抗体水平在1∶200;加入Por B蛋白特异性结合多肽的组形成的微菌落显著少于对照组(P<0.05)。结论NG表面Por B蛋白发挥显著特异性和免疫保护性,但还需大量研究及临床试验来证明其临床效果并进一步分析Por B蛋白的相关机制和作用,为临床NG疫苗的研究提供依据。

主 题 词：淋病奈瑟球菌 Porin B蛋白 特异性 免疫性 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100206[100206] 10[医学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1672-1993.2022.08.036

馆 藏 号：203114407...