骨肉瘤组织中circ0000880表达及其对细胞增殖的影响

作     者：李劲峰 苏会芳 尚国伟 陈松峰 姬彦辉 冷子宽 王义生 刘宏建 Li Jinfeng;Su Huifang;Shang Guowei;Chen Songfeng;Ji Yanhui;Leng Zikuan;Wang Yisheng;Liu Hongjian

作者机构：郑州大学第一附属医院骨科河南省高等学校临床医学重点学科开放实验室450052 

基　　金：国家自然科学基金(82172484) 

出 版 物：《中华实验外科杂志》 (Chinese Journal of Experimental Surgery)

年 卷 期：2022年第39卷第8期

页      码：1553-1556页

摘      要：目的观察骨肉瘤组织和细胞株中环状RNA circ000880表达, 及其对骨肉瘤细胞增殖的影响。方法选取经病理确诊的骨肉瘤的标本共16例, 采用circRNA高通量测序技术检测表达差异的circRNA。提取骨肉瘤及其癌旁组织总RNA, 依据circ000880序列, 设计divergent primer, 扩增包含backsplice junction区域片段, 随后连接入pGM-T载体进行测序鉴定。采用SYBR Green荧光定量PCR, 分别检测骨肉瘤及其癌旁组织, 骨肉瘤细胞MG63、SAOS-2、U2OS及正常人成骨细胞hFOB1.19中circ000880的表达水平。将circ000880小干扰RNA(siRNA)和circ000880 NC慢病毒转染至骨肉瘤细胞后检测细胞中circ000880的表达水平, 并通过细胞计数试剂盒(CCK-8)及克隆形成实验检测对骨肉瘤细胞增殖的影响。两样本两组间比较用t检验。结果采用circRNA高通量测序技术检测结果显示骨肉瘤组织及细胞中circ000880的表达显著上调, 并通过测序鉴定证实circ000880在骨肉瘤组织中存在、且为环状RNA。反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)结果显示circ000880在骨肉瘤组织中的表达量(2.032±0.165)显著高于其癌旁组织(1.105±0.155, t=16.393, P<0.05)。circ00088在骨肉瘤细胞系MG63(2.252±0.140)、SAOS-2(2.134±0.176)、U2OS(2.011±0.226)中表达量均显著高于正常人成骨细胞(1.000±0.092, F=71.299, P<0.05)。转染circ000880 siRNA的MG63细胞中circ000880表达量明显下降(0.646±0.058), 转染circ000880 NC的MG63细胞中circ000880表达水平(1.005±0.121)与空白组(1.000±0.201)比较差异无统计学意义(F=17.977, P<0.05)。CCK-8及克隆形成试验结果显示, 与空白组和阴性对照组比较, 转染circ000880 siRNA的骨肉瘤细胞增殖能力显著受到抑制。结论骨肉瘤组织及细胞中circ000880表达显著上调, 敲低circ000880表达可显著抑制骨肉瘤细胞的增殖能力。

主 题 词：骨肉瘤细胞 环状RNA 高通量测序 细胞增殖 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

D　O　I：10.3760/cma.j.cn421213-20211227-01382

馆 藏 号：203114463...