敲低、过表达NCOA4慢病毒包装及稳转HFL1细胞株构建

作     者：黄德林 陈雅慧 凡志婷 石祥广 黄炎 王少辉 王久存 姜帅 HUANG Delin;CHEN Yahui;FAN Zhiting;SHI Xiangguang;HUANG Yan;WANG Shaohui;WANG Jiucun;JIANG Shuai

作者机构：复旦大学生命科学学院上海200438 

基　　金：国家自然科学基金青年科学基金项目(82000070) 国家自然科学基金委员会面上项目(8203000633) 中国博士后科学基金(2020M670982) 

出 版 物：《生物化工》 (Biological Chemical Engineering)

年 卷 期：2022年第8卷第4期

页      码：1-5页

摘      要：目的:构建敲低、过表达人NCOA4基因的慢病毒载体,建立敲低、过表达NCOA4的HFL1稳转株,为研究NCOA4介导的铁死亡在肺部疾病中的作用提供一个细胞模型。方法:设计NCOA4的shRNA并插入pLKO.1载体;获取人NCOA4全基因组序列并插入pCDH载体。DNA测序验证载体目的基因序列。慢病毒包装载体共转染293T细胞,包装病毒并感染HFL1,使用Western Blot、qPCR检测其敲低、过表达效果。结果:本研究成功构建了NCOA4敲低、过表达慢病毒载体。慢病毒感染人HFL1细胞后,得到敲低、过表达NCOA4基因的HFL1稳转株。结论:成功获取了稳定敲低、过表达NCOA4的HFL1的细胞株,为研究NCOA4介导的铁死亡在肺部疾病中的作用和机制奠定了基础。

主 题 词：NCOA4 HFL1 慢病毒载体 铁死亡 肺部疾病 

学科分类：08[工学] 09[农学] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.2096-0387.2022.04.001

馆 藏 号：203114474...