凡纳滨对虾含酪氨酸酶结构域血蓝蛋白的免疫功能

作     者：张锐 王子昂 汤俊宇 杨林蔚 ZHANG Rui;WANG Zi-ang;TANG Jun-yu;YANG Lin-wei

作者机构：广东海洋大学食品科技学院/现代生化中心广东湛江524088 中山大学生命科学学院有害生物控制与资源利用国家重点实验室广东广州510275 南方海洋科学与工程广东省实验室(珠海)广东珠海519000 广东海洋大学深圳研究院广东深圳518108 

基　　金：广东省基础与应用基础研究基金项目(2021A1515110900) 中山大学中央高校基本科研业务费专项资金(22qntd2615) 

出 版 物：《广东海洋大学学报》 (Journal of Guangdong Ocean University)

年 卷 期：2022年第42卷第5期

页      码：1-8页

摘      要：【目的】克隆凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)一种新的含酪氨酸酶结构域血蓝蛋白(Tyrosinase-domain containing hemocyanin,TDCH),研究其免疫功能。【方法】根据NCBI上公布的tdch基因序列设计克隆引物,通过RT-PCR方法获得tdch的编码区;采用生物信息学方法分析tdch的结构特征;使用荧光定量PCR技术分析tdch在凡纳滨对虾12个组织中的表达,以及在副溶血弧菌(Vibrio parahaemolyticus)、金黄色葡萄球菌(Staphhylococcu saureus)、黑曲霉菌(Aspergillus niger)、白斑综合征病毒、脂多糖及聚肌苷酸-聚胞苷酸[Poly(I:C)]刺激后在鳃和血细胞中的表达变化;利用RNAi技术敲降tdch在对虾中的表达,研究其在对虾抗副溶血弧菌免疫中的作用。【结果与结论】克隆获得tdch的编码区全长,编码551氨基酸的蛋白,理论分子质量为63.37 ku,等电点为7.74;tdch除含有血蓝蛋白结构域以外,还含有酪氨酸酶Tyrosinase结构域;tdch在对虾肌肉、肝胰腺、鳃、胃、表皮、触角、心脏、肠、幽门盲囊、眼柄和神经索中均有表达,眼柄中表达最高,在幽门盲囊中表达最低。Poly(I:C)刺激后,tdch在血细胞中的表达显著升高,在鳃组织中表达变化不明显;其余5种免疫原刺激后,tdch在鳃和血细胞中的表达均显著升高,沉默tdch的表达可导致副溶血弧菌感染对虾存活率显著下降,表明tdch参与了抗副溶血弧菌免疫应答。

主 题 词：凡纳滨对虾 含酪氨酸酶结构域血蓝蛋白 免疫刺激 副溶血弧菌 免疫应答 

学科分类：0906[农学-水产类] 09[农学] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1673-9159.2022.05.001

馆 藏 号：203114482...