基于微滴式数字PCR的急性早幼粒细胞白血病治疗监测相关lnc-LOC100506453检测方法的建立

作     者：白园园 邵麒晖 赵京炜 王归然 陈占国 BAI Yuan-yuan;SHAO Qi-hui;ZHAO Jing-wei;WANG Gui-ran;CHEN Zhan-guo

作者机构：温州医科大学附属第二医院临床检验中心浙江温州325000 浙江省湖州市中心医院检验科浙江湖州313000 

基　　金：浙江省自然科学基金项目(LGF20H200005) 浙江省卫生健康科技计划项目(2021KY216) 温州市基础性科研计划项目(Y20190090) 贺林院士新医学临床转化工作站科研基金项目(18331203) 

出 版 物：《中国卫生检验杂志》 (Chinese Journal of Health Laboratory Technology)

年 卷 期：2022年第32卷第15期

页      码：1796-1800页

摘      要：目的 建立急性早幼粒细胞白血病(APL)患者治疗监测相关lnc-LOC100506453的微滴式数字PCR(ddPCR)定量检测方法,完成方法学评价,并用于APL患者的外周血检测。方法 设计和合成lnc-LOC100506453 ddPCR的引物和探针,优化ddPCR的反应体系和条件。评价所建立ddPCR的方法学性能,包括重复性、特异性、检测下限与定量检测范围。最后用于APL患者的外周血标本的检测。结果 lnc-LOC100506453 ddPCR方法的最佳退火温度为59℃,最佳引物浓度为900 nmol/L。该ddPCR方法的特异性为100%,批间和批内重复性的CV值均<10%。ddPCR方法的检测下限达到0.5 copies/μl,定量检测值为0.5 copies/μl~5 000 copies/μl。在对临床标本的ddPCR检测中,APL患者外周血lnc-LOC100506453表达量明显高于非APL患者和健康对照者(P<0.001)。APL患者诱导分化后的外周血lncLOC100506453表达量低于APL治疗前(P<0.001),APL患者完全缓解后的表达量进一步下降(P<0.001)。结论 本研究所建立的lnc-LOC100506453 ddPCR方法具有较好的方法学检测性能,可用于APL初诊患者的诊断以及APL随访患者的微创治疗监测。

主 题 词：微滴式数字PCR 长链非编码RNA 急性早幼粒细胞白血病 治疗监测 

学科分类：1002[医学-临床医学类] 100214[100214] 10[医学] 

馆 藏 号：203114485...