乳酸菌素Gassericin T基因的人工合成及其组成型表达载体的构建

作     者：刘丽凡 韩文瑜 赵瑞丽 王好 LIU Li-fan;HAN Wen-yu;ZHAO Rui-li;WANG Hao

作者机构：吉林大学农学部畜牧兽医学院吉林长春130062 吉林农业大学动物科技学院吉林长春130062 

出 版 物：《生物技术通讯》 (Letters in Biotechnology)

年 卷 期：2007年第18卷第2期

页      码：227-229页

摘      要：目的:为了研究乳酸菌素Gassericin T的作用机制及应用价值,人工合成Gassericin T基因并构建能高效表达外源蛋白的毕赤酵母组成型表达载体。方法:应用PCR方法从毕赤酵母染色体中扩增GAP启动子,经测序正确后与已线性化的不含pAOX1启动子的毕赤酵母诱导型表达载体pPIC9K连接,转化大肠杆菌DH5α。根据Gassericin T的基因序列,把Gassericin T的结构基因gatA的密码子转换成毕赤酵母偏爱的形式,设计了6条59nt的寡聚核苷酸引物,通过3次连续PCR反应,人工合成gatA片段(简称gat基因),经测序正确后插入pGAP9K质粒的多克隆位点。结果:用GAP启动子(pGAP)取代了pPIC9K上的pAOX1,构建了毕赤酵母组成型表达载体pGAP9K;PCR拼接获得250bp的目的基因序列,将目的基因克隆于pGAP9K,获得组成型表达载体pGAP9K-gat。结论:为下一步在毕赤酵母中组成型表达外源蛋白,研究其作用机理和遗传机制奠定了基础。

主 题 词：乳酸菌素 Gassericin T 基因合成 组成型表达 启动子 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1009-0002.2007.02.015

馆 藏 号：203114748...