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南方根结线虫促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因的RNAi效应分析

南方根结线虫促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)基因的RNAi效应分析

作     者:陈国华 肖罗 张双庆 杨宇红 谢丙炎 CHEN Guo-hua;XIAO Luo;ZHANG Shuang-qing;YANG Yu-hong;XIE Bing-yan

作者机构:中国农业科学院蔬菜花卉研究所北京100081 湖南农业大学长沙410007 美国密西西比大学药学院密西西比38677 

基  金:国家自然科学基金资助项目(30571261 30270236) "十一五"国家高技术研究发展计划课题(2006AA10Z1119) 重大基础研究前期研究专项(2004CCA05300) 农业公益性行业科研专项经费项目(nyzx07-050) 

出 版 物:《植物病理学报》 (Acta Phytopathologica Sinica)

年 卷 期:2008年第38卷第5期

页      码:509-513页

摘      要:促分裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)在线虫的生长发育等方面具有重要作用,本研究探索利用RNAi技术沉默南方根结线虫mapk-1基因来抑制线虫的生长发育。根据mapk-1基因的cDNA序列设计引物,通过体外转录合成约550bp的dsRNA对南方根结线虫的卵进行RNAi以沉默mapk-1基因。试验结果表明,将南方根结线虫的卵块浸泡在含有2mg/mL dsRNA的M9缓冲溶液中,24h后卵块孵化出的2龄幼虫数量明显多于对照组(无dsRNA),但孵化出的幼虫死亡率高达90%,而对照组的死亡率低于5%,说明mapk-1基因的沉默抑制了卵块的孵化和线虫的生长,同时将孵化的幼虫接种番茄,14d后番茄根部无根结产生,35d后无卵块产生;而浸泡72h后卵块孵化出的2龄幼虫几乎全部死亡,并且孵化的线虫数量明显少于对照。提取导入dsRNA的卵块的RNA进行半定量PCR分析,结果表明mapk-1基因的mRNA被降解。

主 题 词:南方根结线虫 卵块 促分裂原活化蛋白激酶(MAPK) RNAi 

学科分类:09[农学] 0904[农学-动物医学类] 090401[090401] 

核心收录:

D O I:10.3321/j.issn:0412-0914.2008.05.009

馆 藏 号:203114789...

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