靶向XT-1基因shRNA真核表达质粒载体的构建及筛选

作     者：余资江 余德立 YU Zi-jiang;YU De-li

作者机构：贵阳医学院贵州贵阳550004 贵阳中医学院第二附属医院 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(30660189) 

出 版 物：《山东医药》 (Shandong Medical Journal)

年 卷 期：2009年第49卷第3期

页      码：19-21页

摘      要：目的构建靶向木糖转移酶-1(XT-1)的短发卡状小干扰RNA(shRNA)质粒表达载体;为寻找脊髓损伤治疗的新靶点提供工具。方法设计4个小分子短发卡状RNA(siRNA)序列,体外合成DNA模板引物,与Pgenesil-1质粒构建成编码shRNAR的表达载体,进行酶切和测序,再转染体外培养的星形胶质细胞,筛选靶序列。结果构建的质粒表达载体完全符合设计要求,转染成功的细胞在荧光显微镜下显示绿色荧光,G418可以筛选出阳性克隆。结论成功构建了编码XT-1-shRNA的质粒表达载体;该载体为寻找脊髓损伤治疗的新靶点奠定了基础。

主 题 词：硫酸软骨素蛋白多糖 木糖转移酶-1 小分子干扰RNA 短发卡状RNA 质粒载体 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 07[理学] 071006[071006] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1002-266X.2009.03.007

馆 藏 号：203114802...