A型禽流感病毒不同拷贝数基质蛋白胞外区基因的原核表达及免疫保护力研究

作     者：李洪涛 张新涛 刘明 刘春国 杜金玲 石薇琳 孙恩成 LI Hong-tao;ZHANG Xin-tao;LIU Ming;LIU Chun-guo;DU Jin-ling;SHI Wei-lin;SUN En-cheng

作者机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所兽医生物技术国家重点实验室/农业部动物流感开放实验室及国家禽流感参考实验室/OIE禽流感参考实验室黑龙江哈尔滨150001 东北农业大学动物医学学院黑龙江哈尔滨150030 黑龙江八一农垦大学动物科技学院黑龙江大庆163319 

基　　金：国家"十一五"科技支撑计划资助项目(2006BAD06A05) 黑龙江省自然科学基金项目(ZJN0702-02) 

出 版 物：《中国预防兽医学报》 (Chinese Journal of Preventive Veterinary Medicine)

年 卷 期：2010年第32卷第10期

页      码：795-799页

摘      要：为研究含禽流感病毒(AIV)不同拷贝数基质蛋白胞外功能区(M2e)亚单位疫苗在SPF鸡体中的免疫保护效力差异,根据已发表的高致病性AIV M2基因序列设计合成两对引物,利用PCR技术扩增单个M2e基因片段,以此为基础顺次串联得到不同拷贝数的M2e基因片段,并将其克隆到pMAL-C2x载体中,构建不同拷贝数的A型AIV M2e基因的重组表达质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE鉴定。表达产物经纯化后免疫家兔、SPF鸡,制备抗M2e融合蛋白的多克隆抗体。Western blot和间接免疫荧光试验检测纯化的融合蛋白免疫原性,间接ELISA测定鸡血清抗体水平,表明MBP-3M2e融合蛋白的抗体水平较高,且MBP-3M2e亚单位疫苗产生最好的免疫保护力。

主 题 词：A型禽流感病毒 M2e基因 原核表达 多克隆抗体 免疫保护力 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

核心收录：

D　O　I：10.3969/j.issn.1008-0589.2010.10.12

馆 藏 号：203114879...