牛、羊布鲁菌多重PCR方法的建立与应用

作     者：杜涛峰 韩文瑜 雷连成 孙长江 李扬 顾敬敏 许会会 DU Tao-feng;HAN Wen-yu;LEI Lian-cheng;SUN Chang-jiang;LI Yang;GU Jing-min;XU Hui-hui

作者机构：吉林大学畜牧兽医学院预防兽医学系长春130062 

基　　金：吉林省省长基金(20070613) 国家支撑计划课题(2008BAD96B11) 

出 版 物：《中国畜牧兽医》 (China Animal Husbandry & Veterinary Medicine)

年 卷 期：2010年第37卷第11期

页      码：80-84页

摘      要：根据布鲁菌属特异性基因BCSP31和布鲁菌种间特异性标志IS711插入序列,设计合成了3对引物,以牛种布鲁菌544A、104M和羊种布鲁菌16M基因组DNA为模板,通过优化反应条件,建立了可同时检测布鲁菌属、牛种布鲁菌和羊种布鲁菌的多重PCR方法。牛种布鲁菌可扩增出301和114bp 2条带,羊种布鲁菌可扩增出301和253bp 2条带,该方法对牛种布鲁菌544A和羊种布鲁菌16M混合DNA模板的最小检出量为100pg,对大肠杆菌O157∶H7、小肠结肠炎耶尔森菌等15种参照菌的核酸扩增结果均为阴性。应用该方法对吉林省某牛场的106份粪便进行检测,虎红平板凝集试验作对照,结果PCR检测9份为阳性,且全为牛种布鲁菌阳性,对应的虎红平板凝集试验也为阳性。结果表明,建立的多重PCR方法具有良好的敏感性和特异性,为布鲁菌病的鉴别诊断提供了一种分子检测工具。

主 题 词：牛种布鲁菌 羊种布鲁菌 BCSP31基因 IS711基因 多重PCR 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

馆 藏 号：203114881...