基于PCR-核酸试纸条快速鉴定鹿茸及其伪品的实验研究

作     者：徐宁 邵博宇 于文莹 迟凯月 马玉贺 马秋贺 艾金霞 李明成 高丽君 夏薇 XU Ning;SHAO Bo-yu;YU Wen-ying;CHI Kai-yue;MA Yu-he;MA Qiu-he;AI Jin-xia;LI Ming-cheng;CAO Lijun;XIA Wei

作者机构：北华大学医学技术学院吉林吉林132013 吉林省中药DNA指纹检测技术科技创新中心吉林吉林132013 

基　　金：吉林省科技厅重点科技成果转化项目资助(20170307001YY) 吉林省科技发展计划项目资助(20200404152YY,20200403047SF) 北华大学医学技术学院晨裕科研创新项目资助(202106) 

出 版 物：《中国药学杂志》 (Chinese Pharmaceutical Journal)

年 卷 期：2022年第57卷第18期

页      码：1528-1534页

摘      要：目的 通过聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)与核酸试纸条相结合的方法,实现鹿茸真伪的可视化检测。方法 采用十二烷基硫酸钠(sodium dodecylsulfate, SDS)碱变性法提取正品及伪品鹿茸样品基因组DNA,通过查找细胞色素C氧化酶亚基I(COI)特异性位点,应用Primer 3.0软件设计鹿茸特异引物,摸索PCR最佳反应体系及条件,建立PCR-核酸试纸条及琼脂糖凝胶电泳鉴定鹿茸真伪的最优条件。同时,通过克隆测序,验证鹿茸真伪鉴定的准确性。结果 本实验中正品鹿茸在PCR-核酸试纸条上均出现两条带,阴性对照及伪品出现一条带,与琼脂糖凝胶电泳结果吻合,且试纸条检测的灵敏度可达1 ng·μL^(-1)。对9个市售鹿茸样品检测,正品鹿茸5个,合格率为45%。结论 自主构建的PCR-核酸试纸条检测方法简单、快速、特异性较好,可在较短时间内实现鹿茸真伪的可视化检测,检测结果稳定,为中药材鉴定提供又一新的方法。

主 题 词：聚合酶链式反应 鹿茸 核酸试纸条 可视化 DNA指纹 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.11669/cpj.2022.18.005

馆 藏 号：203115141...