响应面法优化fHBP-A蛋白双水相萃取工艺的探究

作     者：王壮飞 冀颖 苏桂民 申卫家 杜光远 刘志成 朱卫华 杜琳 WANG Zhuang-fei;JI Ying;SU Gui-min;SHEN Wei-jia;DU Guang-yuan;LIU Zhi-cheng;ZHU Wei-hua;DU Lin

作者机构：北京市细菌性疫苗工程技术研究中心北京100176 北京智飞绿竹生物制药有限公司研发中心北京100176 

出 版 物：《微生物学免疫学进展》 (Progress In Microbiology and Immunology)

年 卷 期：2022年第50卷第5期

页      码：45-52页

摘      要：目的采用双水相萃取技术对重组B群脑膜炎奈瑟菌H因子结合蛋白A(fHBP-A)进行分离纯化,研究不同双水相萃取体系对fHBP-A粗提纯化的影响,应用响应面法优化fHBP-A在PEG/(NH_(4))_(2)SO_(4)双水相体系中的萃取工艺。方法首先建立PEG 2000/(NH_(4))_(2)SO_(4)、PEG 4000/(NH_(4))_(2)SO_(4)、PEG 6000/(NH_(4))_(2)SO_(4)和乙醇/(NH_(4))_(2)SO_(4)共4种双水相萃取体系相图;然后考察PEG相对分子质量、PEG质量分数、(NH_(4))_(2)SO_(4)质量分数、萃取体系pH这4个因素对fHBP-A萃取率、下相中fHBP-A纯度的影响;最后采用Box-Behnken试验设计以及响应面分析对fHBP-A双水相萃取工艺进行优化。结果确定fHBP-A双水相萃取的最佳工艺条件为PEG 4000质量分数为28%、萃取体系pH为6.0、(NH_(4))_(2)SO_(4)质量分数为13%。此条件下fHBP-A纯度达到68.11%。结论采用优化的工艺可以较好地提取及初步纯化fHBP-A,为进一步fHBP-A的纯化研究奠定基础。

主 题 词：H因子结合蛋白 双水相萃取 响应面分析 B群脑膜炎奈瑟菌 纯化 

学科分类：1007[医学-药学类] 100705[100705] 10[医学] 

D　O　I：10.13309/j.cnki.pmi.2022.05.009

馆 藏 号：203115292...