鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体间接ELISA检测方法的建立

作     者：黄小洁 吴华伟 张兵 杨承槐 孔冬妮 侯力丹 杨飞 薛麒 刘丹 HUANG Xiao-jie;WU Hua-wei;ZHANG Bing;YANG Chen-huai;KONG Dong-ni;HOU Li-dan;YANG Fei;XUE Qi;LIU Dan

作者机构：中国兽医药品监察所北京100081 中牧实业股份有限公司农业部兽用生物制品与化药重点实验室北京市兽用多肽疫苗设计与制备工程技术中心北京100095 

出 版 物：《中国兽药杂志》 (Chinese Journal of Veterinary Drug)

年 卷 期：2022年第56卷第9期

页      码：14-21页

摘      要：为建立鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)抗体的间接ELISA检测方法,应用原核表达的IBDV VP2蛋白作为包被抗原,经方阵试验确定间接ELISA试验的最佳反应条件:包被抗原的浓度为8μg/m L,标准阴、阳性血清的稀释度为1∶400,封闭液选用10%马血清,酶标抗体最佳稀释倍数为1∶15000,最佳抗原稀释液为0.01 mol/L PBS(p H7.2),抗原最佳包被条件为4℃过夜,待检血清和酶标二抗反应条件为37℃60 min,底物作用时间为15 min。待检血清的OD_(450nm)≥0.288判为阳性,反之判为阴性。结果显示,该方法的特异性好、敏感高、重复性好。用建立的间接ELISA方法与商品化IDEXX-ELISA试剂盒对临床血清样品进行检测,符合率为95.7%。该方法的建立为检测IBDV抗体提供了一种安全、特异、敏感、方便经济的检测方法,为鸡传染性法氏囊病免疫监测和预防控制提供了科学的技术手段。

主 题 词：鸡传染性法氏囊病病毒 抗体 VP2 间接ELISA 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.11751/ISSN.1002-1280.2022.09.03

馆 藏 号：203115457...