猪圆环病毒2型和弓形虫双重PCR检测方法的建立及应用

作     者：朱桓奕 罗亮 张璇 李照伟 浦同灿 王慧 曾红 杨晓伟 刘霞 赵光伟 Zhu Huanyi;Luo Liang;Zhang Xuan;Li Zhaowei;Pu Tongcan;Wang Hui;Zeng Hong;Yang Xiaowei;Liu Xia;Zhao Guangwei

作者机构：西南大学动物医学院重庆402460 贵州省动物疫病预防控制中心贵州贵阳550008 贵阳市花溪区动物疫病预防控制中心贵州贵阳550025 

基　　金：贵州省科技支撑计划项目(2020-1Y032) 

出 版 物：《中国动物检疫》 (China Animal Health Inspection)

年 卷 期：2022年第39卷第11期

页      码：111-114,120页

摘      要：为建立一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)和弓形虫(Toxoplasma gondii)的双重PCR方法,根据GenBank上已登录的PCV2和弓形虫基因的保守序列,设计了2对特异性引物,并对反应体系及条件进行了优化。首先对单一PCR检测条件进行摸索,确定其最佳检测条件和灵敏性;进而建立两种病原的双重PCR检测方法,通过对退火温度、灵敏性和特异性进行测试,最终确定该方法的反应体系及条件。结果显示:双重PCR方法对PCV2和弓形虫的最低检出限分别为78.16和29.19μg/mL;对伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)和猪瘟病毒(CSFV)等均无扩增,特异性良好。利用该方法对来自川渝地区部分猪场的63份临床样本进行检测,并与单一PCR检测结果进行比对,两种方法的符合率为100%。以上结果说明,本试验建立的双重PCR方法灵敏度高、特异性强、结果可靠、方便经济,可用于PCV2和弓形虫的实验室快速检测。

主 题 词：猪圆环病毒2型 弓形虫 双重PCR 检测方法 应用 

学科分类：090603[090603] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.3969/j.issn.1005-944X.2022.11.020

馆 藏 号：203115483...