CSFV、PRRSV、PEDV和PRV四重荧光定量PCR方法的建立及应用

作     者：王利丽 路超 李富强 鄢明华 任卫科 江珊 池晶晶 张莉 李程 李秀丽 WANG Li-li;LU Chao;LI Fu-qiang;YAN Ming-hua;REN Wei-ke;JIANG Shan;CHI Jing-jing;ZHANG Li;LI Cheng;LI Xiu-li

作者机构：天津市农业科学院畜牧兽医研究所天津300381 国家动物疫病天津观测实验点天津300381 

基　　金：中央级公益性科研院所基本科研业务费院级统筹项目:动物疫病数据中心 天津市科技计划项目(19YFZCSN00570) 天津市重大推广项目(ITTPRS2021003) 

出 版 物：《中国兽医科学》 (Chinese Veterinary Science)

年 卷 期：2022年第52卷第10期

页      码：1259-1267页

摘      要：为了快捷地进行规模化猪场疫病风险评估,建立了一种同时检测猪场环境中猪瘟病毒(CSFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪伪狂犬病病毒(PRV)的荧光定量PCR方法。根据CSFV 5′UTR基因、PRRSV Nsp2基因、PEDV M基因和PRV g E基因保守区,设计特异性引物和探针,通过优化PCR反应条件,建立了四重荧光定量PCR方法。结果显示,该方法可特异性扩增CSFV、PRRSV、PEDV和PRV,与TGEV、RV、PCV2、PPV、PRV Bartha-K61、JEV、***、*** 2等病原体无交叉反应,四种病毒的最低检出值为4.62×10^(1)copies/μL,批内及批间变异系数为0.003~0.016。与国标方法相比,两种方法阳性符合率为83.33%~100.00%(182份组织样品)。运用该方法检测猪场采集的434份肛拭子、鼻拭子及环境样品,肛拭子和环境样品中PEDV检出率较高,分别为16.53%和11.90%;环境样品中PRV检出率较高,为8.28%。综上结果,此方法为规模化猪场进行疫病风险评估提供了一种有效的技术手段。

主 题 词：猪瘟病毒 猪繁殖与呼吸综合征病毒 猪流行性腹泻病毒 猪伪狂犬病病毒 荧光定量PCR方法 疫病风险评估 

学科分类：090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D　O　I：10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0155

馆 藏 号：203115494...