人泛素特异性蛋白酶42在肿瘤组织中的表达及其shRNA干扰重组质粒的构建

作     者：郭紫婵 魏媛 王秀丽 赵蓉 王晓霞 GUO Zi-chan;WEI Yuan;WANG Xiu-li;ZHAO Rong;WANG Xiao-xia

作者机构：山西医科大学生物化学与分子生物学教研室山西太原030001 

基　　金：山西省自然科学基金(201901D111214) 细胞生理学教育部重点实验室(山西医科大学)开放基金(KLMEC/SXMU-201906) 

出 版 物：《中国生物制品学杂志》 (Chinese Journal of Biologicals)

年 卷 期：2022年第35卷第11期

页      码：1338-1341页

摘      要：目的评价人泛素特异性蛋白酶42(ubiquitin-specific protease 42,USP42)在不同肿瘤组织中的表达水平,并构建其shRNA干扰重组质粒。方法通过网络数据库GEPIA和Ualcan分析USP42在不同肿瘤组织中的表达水平。以人USP42 mRNA为靶序列设计合成含有shRNA序列的寡核苷酸,克隆至真核表达载体pGPU6/Neo,构建重组质粒USP42-shRNA。采用Neofect®DNA转染试剂将重组质粒转染至人结肠癌细胞HCT116(干扰组),同时设对照组(转染NC-shRNA),Western blot法检测USP42表达的干扰效果,Transwell小室试验检测USP42对结肠癌细胞迁移和侵袭功能的影响。结果经GEPIA和Ualcan数据库分析发现,USP42在胆管癌、胃癌、胸腺癌和结肠癌等肿瘤组织中呈高表达。测序鉴定证明重组质粒USP42-shRNA构建正确。与对照组比较,干扰组HCT116细胞中USP42蛋白表达水平明显降低(t=16.97,P<0.001),且能显著抑制HCT116细胞的侵袭和迁移能力(t分别为4.974和7.787,P<0.01)。结论USP42可能在多种肿瘤的发生发展中发挥重要作用。建立的重组质粒USP42-shRNA可在HCT116细胞中有效干扰USP42的表达,并能抑制肿瘤细胞的侵袭和迁移。

主 题 词：泛素特异性蛋白酶42 shRNA序列 HCT116细胞 细胞迁移 细胞侵袭 

学科分类：1001[医学-基础医学] 10[医学] 

D　O　I：10.13200/j.cnki.cjb.003741

馆 藏 号：203115535...