基于理性设计提高假交替单胞菌κ-卡拉胶酶热稳定性

作     者：龙柳妃 苏羽 陈艳红 姜泽东 倪辉 李清彪 朱艳冰 LONG Liufei;SU Yu;CHEN Yanhong;JIANG Zedong;NI Hui;LI Qingbiao;ZHU Yanbing

作者机构：集美大学海洋食品与生物工程学院福建厦门361021 福建省食品微生物与酶工程重点实验室厦门市食品生物工程技术研究中心福建厦门361021 

基　　金：福建省自然科学基金项目(2020J01679) 国家自然科学基金面上项目(41976124) 福建省科技重大专项(2020NZ012015) 

出 版 物：《食品科学》 (Food Science)

年 卷 期：2022年第43卷第22期

页      码：159-165页

摘      要：对假交替单胞菌JMUZ2的κ-卡拉胶酶进行理性设计,以获得热稳定性提高的突变酶。用PoPMuSiC在线分析工具对假交替单胞菌κ-卡拉胶酶进行分析,筛选了10个单点突变体。利用定点突变获得突变酶基因,并对突变酶进行诱导表达、纯化及性质鉴定,筛选出酶比活力不降低且热稳定性提高的突变体K155A。热稳定性分析表明,在50、55℃和60℃分别处理40 min,突变酶残余酶活力分别是野生型酶的1.8、2.7倍和4.5倍。酶的结构及分子动力学模拟分析表明,酶分子疏水相互作用和结构刚性的增强是K155A突变体热稳定性提高的可能原因。通过理性设计获得假交替单胞菌κ-卡拉胶酶热稳定性提高的突变体K155A,对改善酶的性质、扩大κ-卡拉胶酶的应用范围以及κ-卡拉胶酶结构与功能关系研究具有重要意义。

主 题 词：κ-卡拉胶酶 热稳定性 理性设计 

学科分类：0710[理学-生物科学类] 08[工学] 0703[理学-化学类] 082203[082203] 0822[工学-核工程类] 

核心收录：

D　O　I：10.7506/spkx1002-6630-20211129-358

馆 藏 号：203115547...