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马疱疹病毒8型荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

马疱疹病毒8型荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用

作     者:李亮亮 于跃 王天娇 丁相丹 胡乐玉 王长法 刘文强 刘桂芹 任慧英 王彤彤 LI Liang-liang;YU Yue;WANG Tian-jiao;DING Xiang-dan;HU Le-yu;WANG Chang-fa;LIU Wen-qiang;LIU Gui-qin;REN Hui-ying;WANG Tong-tong

作者机构:聊城大学毛驴高效繁育与生态饲养研究院山东聊城252000 青岛农业大学动物医学院山东青岛266109 

基  金:聊城大学博士启动基金项目(318051918,318051919) 聊城大学畜牧学高水平学科建设项目(319312101-23,319312101-22) 

出 版 物:《动物医学进展》 (Progress In Veterinary Medicine)

年 卷 期:2022年第43卷第12期

页      码:15-19页

摘      要:马疱疹病毒8型(EHV-8)是近年来在规模化养驴场发现的一种病毒,其主要导致马属动物呼吸困难、繁殖障碍(流产、产弱驹等),严重危害养驴业的健康发展。为建立EHV-8的分子生物学检测方法,用于该病原感染的流行病学调查和致病机制研究,根据NCBI数据库中EHV-8参考毒株ORF 70基因序列的高度保守区域,设计特异性引物,优化程序,建立检测EHV-8的荧光定量PCR方法。结果表明,该方法灵敏度高,最小检测浓度为100拷贝/μL,灵敏度是常规PCR的100倍;特异性强,与EHV-1、EHV-4均无交叉反应;重复性好,组内和组间重复试验变异系数分别为0.15%~0.83%和0.06%~0.47%。利用新建立的方法对120份临床驴血样本进行检测,阳性检出率为32.5%,研究结果为EHV-8的检测和致病性研究提供了可靠的技术支撑。

主 题 词:马疱疹病毒8型 ORF70 实时荧光定量PCR 检测 

学科分类:090603[090603] 090601[090601] 09[农学] 0906[农学-水产类] 

D O I:10.3969/j.issn.1007-5038.2022.12.003

馆 藏 号:203115575...

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