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利用多重连接探针扩增结合熔解曲线法鉴别五味子与南五味子掺杂

利用多重连接探针扩增结合熔解曲线法鉴别五味子与南五味子掺杂

作     者:程华春 王文斌 莫静 聂晶 汪波 CHENG Huachun;WANG Wenbin;MO Jing;NIE Jing;WANG Bo

作者机构:湖北中医药大学药学院武汉430065 湖北大学生命科学学院武汉430062 湖北省药品监督检验研究院国家药品监督管理局中药质量控制重点实验室武汉430075 

基  金:湖北省科技重大专项(2020ACA007) 湖北省自然科学基金重点类项目(2020CFA024) 国家自然科学基金面上项目(81973429) 

出 版 物:《医药导报》 (Herald of Medicine)

年 卷 期:2022年第41卷第12期

页      码:1835-1840页

摘      要:目的探究多重连接探针扩增技术(MLPA)结合熔解曲线在五味子和南五味子鉴别中的应用。方法以五味子和南五味子为研究对象,基于其ITS2序列设计探针进行MLPA反应,通过分析荧光熔解曲线的Tm值对二者进行鉴别,并将此方法应用到市场随机收集的31份五味子和南五味子商品中,通过对聚合酶链反应(PCR)产物测序验证此方法的准确性。结果两对探针都表现出很好的特异性和灵敏度,均只出现对应的单一熔解曲线峰,五味子产生82.3℃的熔解曲线峰,南五味子产生80.7℃的熔解曲线峰。31份五味子商品中,16份商品的熔解曲线Tm值与五味子吻合,15份商品的熔解曲线Tm值与南五味子吻合,实验结果与测序结果一致。结论该研究建立的方法特异性强,灵敏度高,且操作简单方便,可以快速鉴别五味子及其掺混品。

主 题 词:五味子 南五味子 多重连接探针扩增技术 熔解曲线 

学科分类:1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

D O I:10.3870/j.issn.1004-0781.2022.12.019

馆 藏 号:203115584...

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