下瘀血汤抑制肝胶原沉积的最佳配比及机制研究

作     者：沈东晓 杨广越 张玮 陶乐 孙田甜 刘成 SHEN Dong-xiao;YANG Guang-yue;ZHANG Wei;TAO Le;SUN Tian-tian;LIU Cheng

作者机构：上海中医药大学附属普陀医院实验中心上海200062 上海中医药大学附属普陀医院肝病实验室上海200062 

基　　金：国家自然科学基金资助项目(81873136,81803232,81803898,82004106) 上海市普陀区自主创新基金资助项目(ptkwws201904) 上海市卫生健康委员会卫生行业临床研究专项基金资助项目(202040149) 

出 版 物：《中国临床药理学杂志》 (The Chinese Journal of Clinical Pharmacology)

年 卷 期：2022年第38卷第24期

页      码：3014-3019页

摘      要：目的 用均匀设计法筛选下瘀血汤(XYXD)抑制四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化模型胶原沉积的最佳配伍。方法 用CCl4肝纤维化小鼠模型,以大黄、桃仁、地鳖虫为研究对象,根据均匀方案选用U6(63)表分组设计,以肝天狼星红阳性染色半定量分析为筛选指标,通过多元线性回归分析,获得最佳配比(TOR);再次运用上述模型,用试剂盒检测小鼠血清谷丙转氨酶(GPT)和谷草转氨酶(GOT)水平,用天狼星红染色及半定量分析检测小鼠肝胶原沉积,验证TOR抗肝纤维化疗效。最后用实时定量聚合酶链反应检测致纤维化生成相关基因表达,用免疫组化及Western blot法检测α-SMA、Smad2和BAMBI蛋白的表达情况,对TOR抑制肝胶原沉积进行机制分析。结果 正常组、模型组和组分1,2,3,4,5,6组的肝天狼星红染色阳性面积分别为0.25±0.14,3.24±0.95,2.21±0.57,3.14±0.51,2.60±0.50,2.25±0.36,2.28±0.47和2.46±0.48,与正常组相比,模型组的肝天狼星红阳性染色显著增加(P<0.01);与模型组相比,组分1,4,5组肝天狼星红阳性染色均显著降低(P<0.01,P<0.05)。均匀设计结果显示:XYXD抑制肝胶原沉积的最佳剂量配比为桃仁(5 g)+地鳖虫(3 g)。验证结果显示:与正常组相比,模型组的血清GPT、GOT水平及肝天狼星红阳性染色均显著升高(均P<0.01);与模型组相比,下瘀血汤组和TOR组以上指标表达均明显降低(P<0.01,P<0.05)。机制分析显示:与正常组相比,模型组致肝纤维化生成相关基因、α-SMA蛋白、Smad2蛋白表达均明显升高(均P<0.01);与模型组相比,TOR组以上指标表达均明显降低(P<0.05,P<0.01,P<0.001);与正常组相比,BAMBI蛋白表达明显下调(P<0.001),TOR能抑制BAMBI蛋白的下调(P<0.001)。结论 桃仁(5 g)+地鳖虫(3 g)配比可显著抑制CCl4肝纤维化模型胶原沉积,其机制与调控BAMBI/Smads信号有密切关系。

主 题 词：下瘀血汤 肝纤维化 均匀设计 胶原沉积 

学科分类：1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录：

D　O　I：10.13699/j.cnki.1001-6821.2022.24.018

馆 藏 号：203115648...