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党参基因组DNA提取、ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

党参基因组DNA提取、ISSR-PCR反应体系优化及引物筛选

作     者:安娜 郭宏波 周铜水 吴千红 

作者机构:西北农林科技大学生命科学学院杨凌712100 复旦大学天然药物研究中心上海200433 

基  金:西北农林科技大学引进人才基金项目 

出 版 物:《植物研究》 (Bulletin of Botanical Research)

年 卷 期:2009年第29卷第3期

页      码:346-351页

摘      要:对党参基因组DNA提取方法优化、ISSR体系形成及引物筛选三方面进行探讨,为研究党参居群遗传多样性及药材DNA鉴定奠定基础。经比较改良CTAB法、改进的高盐SDS法和试剂盒三种常用DNA提取方法,发现改良CTAB法效果最佳;利用优化设计并结合有关文献优化ISSR反应体系,最优反应体系为:50μL总反应体积中含约20ng DNA模板,1.25UTaq DNA聚合酶,2.25mmol.L-1Mg2+,200μmol.L-1dNTP,0.50μmol.L-1引物。以此体系为基础进行引物筛选,在100条ISSR引物中筛选出13条扩增条带清晰、多态性较高、重复性好的引物。

主 题 词:党参 DNA提取 ISSR—PCR反应体系 引物筛选 

学科分类:1008[医学-中药学类] 1006[医学-中西医结合类] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录:

馆 藏 号:203115654...

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