miR-130b-3p促进人牙源性iPSCs重编程的作用

作     者：谭小兵 张敏 郭宇 杜琳玲 戴青原 TAN Xiaobing;ZHANG Min;GUO Yu;DU Linling;DAI Qingyuan

作者机构：云南省第一人民医院口腔医学中心/昆明理工大学附属医院云南昆明650032 昆明医科大学第一附属医院心内科云南昆明650032 

基　　金：云南省科技厅-昆明医科大学应用基础研究联合专项基金资助项目[2019FE001(-113)] 云南省高层次卫生计生技术人才培养经费基金资助项目(D-2018045) 

出 版 物：《昆明医科大学学报》 (Journal of Kunming Medical University)

年 卷 期：2022年第43卷第12期

页      码：18-22页

摘      要：目的研究hsa-miR-130b-3p对人DPSCs重编程为iPSCs的影响。方法设计合成LV3(H1/GFP&Puro)-hsa-miR-130b-3p-mimics质粒,Lipofectamine 3000将质粒转染到人DPSCs,荧光显微镜观察细胞,RT-qPCR验证转染效率。Sendai reprogramming kit将2组DPSCs重编程为iPSCs(实验组为miR-130b-3pDPSCs,对照组为DPSCs),对比2组iPSCs克隆形态和重编程效率,RT-PCR检测Oct4、Nanog、KOS、Klf4、c-Myc的表达。结果hsa-miR-130b-3p过表达质粒转染48 h后在DPSCs内有明显表达,证实高效的转染效率(P<0.01)。Sev重编程得到的2组iPSCs均呈现为扁平致密的圆形克隆,边缘清晰平滑,集落内细胞形态均一、核质比较大,RT-PCR结果表明2组细胞均可表达干细胞特异标志物Oct4和Nanog,同时外源性病毒SeV或转录因子KOS/Klf4/c-Myc不再表达。实验组的重编程效率高于对照组(分别为0.037%和0.018%,P<0.05)。结论hsa-miR-130b-3p可明显促进人DPSCs重编程的效率,为iPSCs应用于牙髓再生治疗提供研究基础。

主 题 词：牙髓干细胞 重编程 诱导性多能干细胞 微小RNAs 过表达 

学科分类：1003[医学-口腔医学类] 100302[100302] 10[医学] 

D　O　I：10.12259/j.issn.2095-610X.S20221204

馆 藏 号：203115698...