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人甲状旁腺素活性片段前体物Pro-Pro-hPTH(1-34)的制备及活性研究

人甲状旁腺素活性片段前体物Pro-Pro-hPTH(1-34)的制备及活性研究

作     者:王春晓 金亮 陆毅 康永锋 刘景晶 WANG Chun-xiao;JIN Liang;LU Yi;KANG Yong-feng;LIU Jing-jing

作者机构:上海水产大学食品学院上海200090 中国药科大学生命科学与技术学院江苏南京210009 

基  金:国家高技术"863"计划(2002AA2170312) 国家自然科学基金(30270298) 上海市重点学科建设项目(T1102) 上海水产大学项目(05207) 

出 版 物:《沈阳药科大学学报》 (Journal of Shenyang Pharmaceutical University)

年 卷 期:2006年第23卷第12期

页      码:807-813页

摘      要:目的制备出具有生物活性的人甲状旁腺素活性片段类似物,并对其活性进行考察。方法采用基因工程方法:大肠杆菌BL 21为宿主菌,pET 28a为表达载体,天门冬酰胺酶Ⅱ切除信号肽的C末端片段为融合伙伴,在融合伙伴和目的肽结合处引入Asp Pro酸敏感位点及二肽酶Ⅳ识别的N端Pro Pro位点,之后经诱导表达,酸水解使融合伙伴和目的肽分离。结果成功构建了hPTH(1 34)的融合表达体系,它能高效表达含hPTH(1 34)的融合蛋白,经纯化,得到多肽纯品,经鉴定,该多肽的分子量、氨基酸组成均与设计的分子相符,工程菌中用于编码该多肽的DNA片段其测序结果也与原设计相符,是表达该多肽的正确模板。该多肽在Parsons雏鸡分析及卵巢摘除大鼠模型试验中均显示显著活性。结论用基因工程方法成功地制备出人甲状旁腺素活性片段类似物,该产物具有显著生物活性及潜在的药用价值。

主 题 词:人甲状旁腺素 活性片段 生物活性 二肽酶Ⅳ 

学科分类:0710[理学-生物科学类] 07[理学] 08[工学] 09[农学] 071007[071007] 0901[农学-植物生产类] 0836[0836] 090102[090102] 

D O I:10.3969/j.issn.1006-2858.2006.12.017

馆 藏 号:203115716...

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