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多重位点特异性PCR同时鉴别酸枣仁及其掺伪品

多重位点特异性PCR同时鉴别酸枣仁及其掺伪品

作     者:李柯帆 索晓雄 李晓兰 杜晨晖 闫艳 裴香萍 LI Kefan;SUO Xiaoxiong;LI Xiaolan;DU Chenhui;YAN Yan;PEI Xiangping

作者机构:山西中医药大学中药与食品工程学院山西晋中030619 山西大学中医药现代研究中心太原030006 

基  金:山西省中药现代化振东专项基金项目(2016ZD0104) 国家自然科学基金青年科学基金项目(81603251) 

出 版 物:《中国实验方剂学杂志》 (Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae)

年 卷 期:2023年第29卷第2期

页      码:141-148页

摘      要:目的:优化并建立多重位点聚合酶链式反应(PCR)体系同时鉴别酸枣仁、枳椇子和理枣仁及不同掺伪量,解决酸枣仁药材商品及其制剂的掺伪难题。方法:通过分析比对酸枣仁及其伪品的内部转录间隔区(ITS)序列差异找到特异性单核苷酸多态性(SNP)位点,设计特异性鉴别引物,通过优化退火温度、循环次数及引物浓度,评估不同聚合酶种类和不同PCR仪等扩增条件对不同来源的酸枣仁、枳椇子及理枣仁样品进行特异性扩增,根据特异性扩增条带大小进行鉴别,并对最低检测限和掺伪检出限进行研究。结果:在退火温度为63℃,循环次数为23次时,酸枣仁、枳椇子和理枣仁分别扩增出549、169、389 bp的特异性条带。该方法对酸枣仁和理枣仁的最低检测限为0.24 ng,枳椇子为1.2 ng,对酸枣仁、枳椇子和理枣仁的掺伪检出限分别为0.5%、2%和2%。结论:该文建立的多重位点特异性PCR鉴别方法能同时准确鉴别酸枣仁、枳椇子和理枣仁,对解决酸枣仁药材掺伪问题提供基础研究,为控制酸枣仁药材质量安全及临床应用提供参考。

主 题 词:酸枣仁 枳椇子 理枣仁 多重位点特异性聚合酶链式反应(PCR) 鉴别 掺伪 

学科分类:1008[医学-中药学类] 100504[100504] 1006[医学-中西医结合类] 1005[医学-中医学类] 1001[医学-基础医学] 100501[100501] 100601[100601] 100602[100602] 10[医学] 

核心收录:

D O I:10.13422/j.cnki.syfjx.20221315

馆 藏 号:203115779...

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